实验问答

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问对于肿瘤细胞与淋巴内皮细胞的共培养应该如何选择培养条件？

loveliufudan

对于肿瘤细胞和淋巴内皮细胞的共培养，选择合适的培养条件非常重要。以下是几点建议：培养基：选择适合于肿瘤细胞和淋巴内皮细胞生长的培养基。通常使用RPMI-1640或DMEM作为培养基。细胞密度：适当调整细胞密度，以获得最佳的共培养效果。过高的细胞密度可能导致培养基中的营养物质过快耗尽。添加物：适当添加生长因子，如EGF和TGF-β，以促进细胞生长和增殖。培养环境：控制环境温度，湿度和CO2浓度以保证

1 回答389 围观

问细胞进行转染后，可以通过什么实验检测转染效率？

sswei

可以通过以下方法检测:一、实时定量PCR检测实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-time PCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的

4 回答4649 围观

问临床心血管病杂志

土井挞克树

这个时候的录取几率就比较大了，一般一个月会有回复，半年能见刊

3 回答338 围观

问谷氨酸棒杆菌敲除的第一次重组菌中没有原基因

土井挞克树

转进去就是一个条带了，电转失败率高。

2 回答349 围观

问荧光定量PCR求教

dxyc42u

SD一般控制在0.2一下，ct值每个板子算每个板子，不能板间比较

3 回答583 围观

问小鼠巩膜提取RNA的含量大约有多少？

土井挞克树

一般15-20就足够实验需求了。

4 回答313 围观

问有谁会提病毒RNA，帮我看看有没有降解

土井挞克树

条带模糊一般考虑存在降解，建议更换。

3 回答235 围观

问肿瘤干细胞贴壁

huarenqiang5

可能是培养基含有各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白导致。

3 回答434 围观

问单核和树突细胞培养

土井挞克树

考虑是细胞碎片，周边可以看见类似崩解的细胞结构

3 回答653 围观

问请教各位大咖，一般小鼠巩膜提取RNA的含量大约有多少？谢谢！

土井挞克树

一般提取10-15就可以满足大部分的实验需求了

3 回答431 围观

问求助！多肽设计和流氏分选单个B细胞

龙大人驾到

首先，需要先获取H1、H3和H5三种HA的序列数据，并结合了解相关病原体的生物学特性。接下来，你可以使用不同的软件包（如BLAST）来搜索出与H1，H3和H5 HA蛋白最相似的多肽序列，并建立一个比对记录表。然后，您可以使用不同的软件设计策略来筛选出特异性较强的多肽，这些多肽将用于偶联蛋白。最后，您可以使用不同的蛋白表达系统进行偶联蛋白的表达和检测，以确定其状态和活性。

2 回答450 围观

问求助：-80℃冻存的甘油菌（大肠杆菌）划板怎么不长菌啊

huarenqiang5

可能是甘油的浓度问题或细胞中形成的冰晶有可能会损坏脆弱的细胞膜结构，这样在解冻后细胞就不能正常的存活了。

5 回答4311 围观

问关于抑制细胞生长的药物暴露后细胞活力大于100%的问题

土井挞克树

这种情况多是因为你的实验条件控制不严格，也就是干扰因素和混杂因素的影响大，影响了实验结果

3 回答3194 围观

问只在免疫细胞上表达的蛋白的免疫组化，如何进行评分

huarenqiang5

可使用Image Pro Plus 软件进行统计评分分析。具体方法可以在网上搜索 Image Pro Plus 的操作方法即可，简单上手。

3 回答606 围观

问请教大家，培养的成纤维细胞系复苏后24h生长正常，但是48h后就大量圆缩且悬浮了是为什么？无法继续增殖生长，甚至无法长到50%

申东熙老伯

成纤维细胞对细胞密度比较敏感，过于稀疏不行，过密也不行。选择适当的培养皿复苏养着看看。

4 回答367 围观

问人参皂苷re，rg3，Rb1，有紫外吸收吗

龙大人驾到

参皂苷RG3和RB1是有紫外吸收的，具体的紫外吸收范围可以参考科学文献。

4 回答1073 围观

问如果在GEO数据库中没有找到GEO2R该怎么处理数据呢

龙大人驾到

如果在GEO数据库中找不到geo2r数据，可以使用已有的数据库（如NCBI的Gene Expression Omnibus），或采用相关的分析工具，如R和Python，来处理数据。在这种情况下，可以采用统计学方法（如对数变换，标准化等）对数据进行处理，从而得到归一化的数据。

4 回答3264 围观

问高效液相检测人参皂苷含量，流动相加醋酸还是磷酸缓冲液哪种好及理由?

龙大人驾到

磷酸缓冲液，因为磷酸缓冲液具有良好的稳定性、高效性和耐变性，可有效抑制由于pH值变化所引起的人参皂苷含量变化，从而提高液相检测的精准性。

4 回答506 围观

问所克的基因的CDs为950bp左右，上下游引物的Tm值为56.4—59.9，用Taq酶克，试了多个温度梯度克不出来，求合适的温度

龙大人驾到

Taq DNA酶的活性范围一般介于55-72℃，温度过低、过高都会对酶绒毛发挥作用产生不利影响，因此应选择合适的温度，分子量较大的基因应优先选择较高的温度，而对于950bp左右的基因，选择合适的温度一般应保持在62-65℃，以便获得最佳的PCR扩增效果。

3 回答300 围观

问动物实验，构建动物模型

龙大人驾到

可以使用一种可吸收的皮肤膨胀器，比如用水可吸收的聚羟基甲酸/钠（PAA/Na）。它可以以最大的塑料性，从而制成一个薄的、可折叠的膜。皮肤扩张器由羟基甲酸/钠（PAA/Na）分子制成，它具有可吸收的特点。当它被注入皮肤时，它会扩大皮肤，增加皮肤张力。在暴露在外部环境中一段时间后，羟基甲酸/钠就可以被吸收，从而形成一个紧致、稳定的模型。

4 回答599 围观

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