实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问细胞免疫诊断相关的问题

sswei

细胞免疫治疗法是一种安全有效，被医学界越来越关注的一种医疗方法。强免疫细胞治疗技术是利用生物技术和生物制剂对采集自患者体内的免疫细胞进行体外培养和扩增，再将其送回患者体内。它在杀死残余肿瘤细胞的同时，刺激和增强人体自身的免疫功能。以达到治疗肿瘤、预防复发的目的。与传统的治疗方法(手术、化疗、放疗)相比，细胞治疗是“取之于身，用之于身”。本品安全有效，毒副作用较强，具有特异性和个体化特点。细胞免疫治

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问请问人吸脂的脂肪要提原代干细胞的话，可以在冰箱里保存多久？

sswei

一般情况下建议脂肪抽取出来后立即使用，如果暂时不想使用，可以抽取出来后尽快分离冷藏可以保持2个月左右时间！脂肪要想保存需要在-167°以下的超低温液氮冰箱里保存，而且保留最长不能超过3个月，需要24小时检测温度，预备电源防止突然断电，否则脂肪解冻活性必将受影响，严重可能还会有污染、感染等情况发生，所以对于存储来说就是一大难关，而且单是储存的费用就非常昂贵。

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问脂肪乳注射液的滤膜选择

龙大人驾到

通常在做HPLC分析时，脂肪乳注射液试剂都需要经过过滤，以确保试剂质量和准确性。在选择滤膜时，一般建议选用有机系滤膜，因为脂肪乳注射液试剂本身是有机溶剂系的，使用有机系滤膜可以有效避免试剂的反渗透。但是还是要根据具体的试剂和分析要求来决定使用哪种滤膜，以保证最佳的分析结果。

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问小鼠如何经皮颈动脉取动脉血

sswei

先将小鼠仰位固定，切开颈部皮肤，在气管两侧分离出颈动脉，远心端结扎，将针头朝近心端刺入，动脉血压力大，只需轻轻抽吸。

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问WB曝光的条带整体模糊，条带边界发毛，这是为什么？

申东熙老伯

可能是转膜的时候，三明治结构之间滑动了。

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问请问各位大佬，药学的什么期刊什么类型比较好投，论文小白

龙大人驾到

"British Journal of Clinical Pharmacology"，"Journal of Pharmaceutical Sciences"，"Pharmacology & Therapeutics"

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问NCBI里面怎么搜一种菌的所有信号肽

龙大人驾到

访问 NCBI 的官网（www.ncbi.nlm.nih.gov）。点击顶部的“搜索”标签，然后在搜索框中输入该菌的完整名称或简称。选择“生物序列”作为搜索类型，然后点击“搜索”按钮。筛选结果，找到该菌的基因组数据库。进入该基因组数据库，查看该菌所有基因的列表。使用“信号肽”作为关键词在基因列表中搜索，找到所有包含信号肽的基因。查看每个基因的序列详细信息，提取信号肽序列。如果没有找到满足要求的信息

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问蛋白标签

龙大人驾到

可能有如下几方面的问题蛋白质表达水平过低：如果蛋白质的表达水平很低，那么Flag标签就可能很难被检测到。1.Flag抗体效仿不足：Flag抗体可能不够敏感，导致Flag标签没有被检测到。2.Flag标签不稳定：Flag标签在表达和纯化过程中可能不稳定，导致在Western blot实验中没有被检测到。3.Western blot技术问题：有可能是技术问题，例如抗体稀释比例不合适，板材过于热或者环境

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问求助想验证多糖和细胞膜上蛋白结合可以用什么方法

龙大人驾到

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问请问qpcr的目的基因cq值在多少范围合适呀？

申东熙老伯

cq值范围跟浓度相关，一般18－35个循环都可以。

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问求助动脉根HE染色斑块范围统计方法

huarenqiang5

空洞考虑是切片导致的，统计斑块的厚度要去掉图中红色圈中的空洞。

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问请教如何设计实验证明所研究蛋白是1次跨膜还是2次跨膜

龙大人驾到

利用免疫印迹技术（immunoblotting）：常见的技术会用一种特定的蛋白抗体来检测细胞膜上的蛋白表达，这是最常见的实验。在实验中，你可以用一种抗体来检测细胞膜上的两种跨膜蛋白的表达，以证明一次跨膜蛋白(hi)被检测到

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问生存曲线交叉

a807989061

Cox模型又称比例风险模型，分析发生某种结局（如死亡）的时间与危险因素的联系。所谓等比例风险，其实简单来说很容易理解：它表示，在研究期间内，某因素对生存的影响在任何时间都是相同的，不随时间的变化而变化。如吸烟对肿瘤的影响，不管是第一年、第二年、……，对肿瘤的危险都是相同的。而检验这一假定条件的方法其实也很简单：可以观察分类协变量的每组的KM曲线间是否无交叉，若无则通过。因此就可以采用Landmar

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问求助各位大神过氧化氢诱导细胞衰老模型怎么构建？用200uM刺激4h培养24h，b-半乳糖苷酶未染上色

龙大人驾到

构建过氧化氢诱导细胞衰老模型的方法如下：1.细胞培养：选择需要研究的细胞株，并在培养皿中进行细胞培养。2.添加过氧化氢：在培养液中添加适量的过氧化氢（通常为200 μM），然后用于刺激细胞4小时。3.细胞观察：在刺激后1天，观察细胞的生长情况，并进行相关的实验操作。对于b-半乳糖苷酶未染上色的情况，可能是由于染色方法不正确或染色时间过短造成的。也有可能是由于细胞衰老的过程影响了b-半乳糖苷酶的表达

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问想要研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异该如何设计实验？

龙大人驾到

如果想研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异，可考虑以下实验设计：1.生产纳米颗粒：按照比例合成不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒。2.动物模型：使用动物模型（例如小鼠），比较不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对DC引起的免疫反应的影响。3.免疫反应评估：评估不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对动物免疫系统产生的影响，包括测量细胞因子和抗原呈递分子的表达。4.数据

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问各位大神，请问合成的30多bp带有fam的双链DNA，进行核酸变性电泳时跑出来条带不单一，形状像吐司是什么原因呢？如下图

土井挞克树

dna纯度不够，先纯化dna再跑

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问请问洁净室沉降菌监测，国标上万级的结果是≤3/cfu，采用静态监测和动态监测结果会不同吗？

龙大人驾到

洁净室的沉降菌检测主要目的是评估洁净室内的细菌数量。根据国标，万级洁净室的结果应不大于3个CFU/m3。静态检测和动态监测结果可能会有所不同，因为它们使用的方法不同。静态检测通常是在洁净室内放置一些培养基，然后在特定时间后收集样本，以检测细菌数量。动态监测则是不断监测洁净室内的空气，以评估细菌数量。由于静态检测和动态监测使用的方法不同，因此结果可能会有所不同。静态检测可能更容易受到环境因素的影响，

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问细胞单克隆对培养基有什么要求吗，日常培养用的化学合成无血清培养基可以用来做单克隆吗

龙大人驾到

单克隆细胞对培养基的要求一般比较严格，因为它们需要适宜的生长条件来保持稳定的生长和分裂。化学合成无血清培养基，是一种常用的培养基，它们通常可以用于细胞的日常培养。但是，如果你想要进行单克隆细胞培养，则可能需要使用含有血清的培养基，例如有血清培养基（FBS）或牛血清。这是因为血清可以提供必需的生长因子和营养，以维持细胞的生长和分裂。

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问引物设计求助！！！

xijun_song

什么基因？可以帮设计引物，欢迎交流。

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问流式细胞PI单染中为什么用RNAse？

dxy_ju4vzuyw

PI是常用染料，但嵌入到双链Dna和Rna的碱基对中与之结合，无碱基特异性，故染色前必须用RNase A处理细胞，排除双链Rna的干扰

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