实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问已知目的因子，可变剪切因子的筛选

huarenqiang5

可变剪切分析采用SplicSeq软件对TCGA中的转录组数据进行可变剪切分析，分别统计可变受体位点(AA)、可变供体位点(AD)、可变启动子(AP)、可变终止子(AT)、内含子保留(RI)、外显子跳跃(ES)、外显子互斥(ME)等7种可变剪切形式的可变剪切事件。其中外显子跳跃类型的可变剪切事件最多。单因素生存分析7种类型的可变剪切事件，分别进行单因素的Cox生存分析，

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问磁珠法植物DNA提取试剂盒提取的核酸，纯度只有1.1左右，是什么原因？应该如何调整？

huarenqiang5

考虑以下原因： (1)裂解不充分； (2)微球分散性不好； (3)微球吸附能力太强。（4）磁珠吸附能力较弱； (5)磁珠洗脱效率较弱； (6)提取试剂(pH、盐、醇)与磁珠不匹配。建议按以下几点进行优化：（1)优化试剂裂解液配方； (2)筛选合适粒径及表面的磁珠； (3)磁珠表面钝化处理。 (4)改变表面基团种类及密度； (5)减少干燥时间、加热洗脱

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问德国tse代谢笼系统监测问题

sswei

不同重量的小鼠有不同型号的代谢笼。如果用40多g的小鼠做实验，建议更换比30多g大的型号的代谢笼。

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问培养秀丽隐杆线虫做寿命分析,大家都是添加多少浓度的5-FU,抑制卵的发育的,做实验卵会孵化影响实验结果,求助！

土井挞克树

一般10-50ug的剂量就足够了。

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问PCR怎么防止水中出现条带？

土井挞克树

体系更换一次吧，目前考虑还是体系内存在污染，酒精不足以清除污染物。

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问细胞增殖检测中的问题？

土井挞克树

可以把细胞图片显微镜下观察，或者做流式实验。

3 回答372 围观

问家人们这个引物怎么设计啊

土井挞克树

可以上ncbi网站上把你的序列输入，然后进行引物设计。

3 回答250 围观

问流式染色是不是一定要避光进行？

土井挞克树

看你的荧光类型，见光会严重影响荧光的结合，建议避光。

3 回答294 围观

问加入了10%FBS/DMEM能在四度冰箱存放几天？

huarenqiang5

可以放到4℃冰箱中1个月左右，但是要避光。

3 回答985 围观

问小鼠睾丸活精子抑制观察实验中用什么避孕药？

土井挞克树

一般可以选用sAC抑制剂来抑制小鼠睾丸活性

3 回答347 围观

问目前用Trizol法提取骨髓细胞RNA，浓度小的可怜，有没有什么提取RNA的好方法呀？或者说有没有什么改良法呀？

huarenqiang5

你这个主要考虑以下原因：(1) 样品裂解或匀浆处理不彻底。(2) 最后得到的RNA沉淀未完全溶解。也可以试试过柱法、磁珠法等。

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问请问大家用10%FBS/DMEM养骨髓细胞，还是会越养越少这是为什么呢？

loveliufudan

骨髓细胞是一种具有很高分化能力和生长速度的细胞类型，但是其生长需要满足一定的营养和生长条件。在使用10% FBS/DMEM培养骨髓细胞时，虽然FBS可以提供生长所需的营养物质，但是不同批次的FBS质量可能存在差异，有时可能会影响到细胞的生长和增殖。此外，细胞的生长和增殖还受到一些其他因素的影响，如细胞密度、培养皿大小、培养时间等。如果细胞密度过高，细胞之间的竞争和代谢产物积累可能会影响到细胞的生长

7 回答386 围观

问为什么纤维素酶酶解后测的粗纤维含量比未酶解的高

sswei

一些非纤维素或半纤维素的被误认为粗纤维，导致含量增高

4 回答595 围观

问质谱问题请教

sswei

EGFP连着P2A，再连着目标基因，从而对结果产生干扰

4 回答851 围观

问羊水核型总是这样怎么解决

sswei

需要进一步做染色体微阵列，临床上也叫基因芯片，也叫染色体芯片，来进行排查

3 回答332 围观

问求助：请教下各位大神这个是什么细胞？

loveliufudan

好像有癌细胞、炎症细胞和间质细胞

3 回答347 围观

问派森诺基因云肠道菌群曼哈顿图

huarenqiang5

是的，将给药组设置为上调组，对照组设置为模型组。

3 回答607 围观

问The Transcreener CD73 Assay

sswei

因为CD73是嘌呤信号的重要信使。外核苷酸酶是质膜结合酶，具有外向的活性位点，可将核苷酸代谢为核苷，对维持免疫稳态至关重要。CD39，将 ATP 和 ADP 水解为 AMP。AMP 被 CD73 进一步加工成腺苷，通过测量腺苷的产生，研究人员可以有效地确定酶的活性，以帮助寻找癌症等疾病的新疗法。从而对许多疾病状态产生重大影响。最近的研究表明，腺苷在肿瘤微环境中的免疫抑制中发挥着关键作用，并且外核苷

3 回答577 围观

问求助image lab大佬泳道百分比分析

huarenqiang5

按照以下步骤进行操作试试：1.首先打开你要分析的数据，一般是scn这个格式才能打开，也就是说用这个软件曝光的才能用这个软件来统计。2.选择左侧的体积工具，选择矩形3.用鼠标圈中你分析的条带U14.然后复制这个矩形，粘贴八个5.分别圈住所有的条带6.然后点一下分析表，就出现了相应的表格7.然后选择表格上面最右侧的按钮，导成Excel文件8.一般背景深的话，选调整体积徒手圈也可以。也可以选择哪一个泳道

3 回答1371 围观

问细胞电镜求分析

小锦鲤木子

图片在哪里呀？？？建议到教材中好好学学细胞器

5 回答634 围观

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