实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问【救助】请问96孔板铺的细胞少了还能拯救吗？

juyue2010

如果刚铺不久，可以的，否则就重新铺一块板，补救更合适一些。

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问噬菌体展示技术建库

huarenqiang5

自己建库的话比较难，要的时间也比较多，还是建议先生物公司合作比较省事。

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问请教二元logistic.回归

loveliufudan

如果单个因素在单因素t检验中具有统计学意义，但在二元logistic回归中没有意义，这可能是由于多个因素之间存在共线性。共线性是指两个或多个自变量之间存在强相关性，这会导致模型中的系数不稳定，难以解释和理解。在这种情况下，可能需要考虑使用多元回归分析或进行变量选择，以识别哪些因素对结果有显著影响。另外，三个因素存在正负相关性也可能会导致回归分析结果不准确。在这种情况下，可以考虑使用因子分析或主成分

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问外周血提RNA降解

huarenqiang5

可以按以下实验步骤进行：1.收集新鲜人血液并立即用Ficoll分离白细胞。2.用冰冷PBS洗涤外周血淋巴细胞3次。3.在50ml塑料离心管中收集外周血淋巴细胞，并加入7ml裂解缓冲液(可溶解达到5×108个外周血淋巴细胞)，然后剧烈涡旋振荡以溶解细胞。4.加入7体积(49m1)4molL氯化锂，4°℃孵育15~20小时(过夜)。5.将悬液转移到30mlCorex管内，在吊桶式转头内4°℃离心2小时

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问小鼠粪便菌群移植

huarenqiang5

对于小鼠粪便样本的采集，建议采用拎尾法进行采集。小鼠排便后用灭菌的镊子夹取小鼠粪便，样本通常需 1g 左右，最少不低于 0.2g。样本采集后立刻放入-80℃冰箱进行低温保存，建议进行备份。若条件不允许，可短期（1 个月内）在-20℃冰箱中冷冻保存。注意在样本冻存期间，请勿反复冻融。送样时请尽量使用冰盒（泡沫盒+干冰+冰袋），以保证运输过程中的低温条件（干冰的挥发消耗量约为 3 公斤/天）。在打包

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问酶标仪黑色96孔板

huarenqiang5

黑色的酶标板一般用于荧光检测。而不能同时测OD。

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问菌株鉴定

loveliufudan

可以通过比对16S rRNA序列和全基因组序列中的16S rRNA基因来确定是否是目标菌株。具体步骤如下：从16S rRNA序列和全基因组序列中提取16S rRNA基因序列。将16S rRNA基因序列提交到NCBI的BLAST或其他序列比对工具进行比对。将16S rRNA测序结果也提交到NCBI的BLAST或其他序列比对工具进行比对。比对结果会显示比对的相似度和匹配的区域。如果16S rRNA测序

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问【求助】小鼠血清的解冻

huarenqiang5

血清解冻需采用逐步解冻法:-20°C或 -80 C低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20 ℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。影响使用效果。

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问博来霉素法构建肺纤维化动物模型？

huarenqiang5

【造模方法】小鼠：选用体重18～20g的雄性昆明小鼠。氯胺酮(100mg/2ml)腹腔注射(10mg/100g)，将实验动物麻醉后仰卧，纵行切开皮肤，钝性分离暴露气管，用4号针头刺入气管，尽量接近气管分叉处，将0.05ml博来霉素缓慢滴入(博来霉素每支8mg，用前以生理盐水配制成0.2％药液)，立即将动物直立旋转，使药液在肺内均匀分布，然后缝合皮肤，局部乙醇消毒防止感染。同样，也可选用雌性BLAB

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问细胞支原体检测可以不在生物安全柜进行吗

huarenqiang5

细胞支原体检测需要在生物安全柜进行，并且需要对生物安全柜进行消毒处理。

3 回答387 围观

问meta分析直接把发病率IRR 直接当成OR值进行比较

huarenqiang5

把发病率直接当成OR值进行比较肯定不合适。

3 回答600 围观

问使用一个数据库写文章，第一次已经通过伦理审批，以后用该库写文章都需要伦理审批吗

土井挞克树

不同的文章伦理证明是不通用的，也就是需要重新审批

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问临近毕业文章被拒了，还提了好多问题怎么办？

土井挞克树

如果就想投这个杂志的话可以考虑延迟毕业，如果想毕业建议更换杂志

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问学位论文

sswei

要根据该论文是否有创新性，是否符合杂志的要求等情况才能决定可否发表。

4 回答208 围观

问求助：骨科杂志分区

土井挞克树

类似OSTEOARTHRITIS AND CARTILAGE的是一区杂志

3 回答305 围观

问世界中医药杂志介绍信和授权书

土井挞克树

如果超过了时间就找编辑好好说一下吧，不过希望不大

3 回答429 围观

问frontiers in physiology投稿相关问题

土井挞克树

等待，既然已经说明那么编辑看到了就会处理

3 回答245 围观

问流式细胞仪检测问题求助？

huarenqiang5

1、首先确认你的细胞已经从G0/G1期出来了，其次G2 S期的细胞本来就比G1的要少，你可以加个G2期阻滞的化合物做个对照。2、其次单染需要乙醇固定的时间长些，起码2小时以上，过夜也没问题。3、乙醇不能用纯乙醇，需要70％的乙醇。

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问脑组织病理

huarenqiang5

图一考虑是神经元细胞，图二考虑是胶质细胞。

4 回答385 围观

问冻存细胞复苏后，一直有黑点漂浮，是支原体污染吗

默然前进前行

首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好，反复冻融的结果;(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;

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