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        Renca细胞培养形态改变

        相关实验:🔥 原代细胞培养实验

        user-title

        刘奥La1028

        小鼠肾癌Renca细胞培养遇到问题,已经反复尝试复苏新的细胞,换培养基,支原体阳性已支原体治疗等,均无明显改善,总是养着养着就会出现细胞形态改变情况,出现时间不定,可能复苏后1天,可能1周,可能半个月才出现。后续的基因编辑一直无法开展,这样的形态,感觉无法继续做下去,急毕业,求指点,每次看到这样的变化,就和死亡通告一样,第二天细胞就形态完全变掉了,很可怕。血清使用的国产BI的。图片描述

        细胞培养一段时间会出现,局部的细胞变圆皱缩,有时养一段时间就会出现,出现时间不定。

        图片描述

        第2天,几乎所有细胞都会出现形态改变,类似传染病一样,细胞皱缩,形态变化,周围小黑点比较多,但仍然可以以正常增殖速度传代培养,但贴壁性变差,成瘤性会变差

        图片描述4倍镜下观察,形态改变更明显,之后继续培养会一直是这样子
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        4 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        这考虑是支原体污染了,进行进行消毒处理。

        user-title

        sswei

        有帮助

        细胞形态发生改变的原因主要有以下几点:

        1. 细胞密度

        原因:细胞密度过大,细胞间相互挤压变形。

        解决方法:一般传代后即可恢复;勿密度太大才传代。

        2. 培养条件

        原因:使用不同的培养基。

        解决方法:使用适合该细胞生长的的培养基。

        3. PH值

        原因:细胞培养用的培养液胰酶或者PBS等试剂PH不适合细胞生长,例如偏酸或者偏碱。

        解决方法:如细胞生长变化不大,培养基颜色却变化太快,建议检测使用的培养基PH,换用PH合适的培养基。

        4. 药物处理

        原因:加除支或者两性霉素B等药物后,细胞形态可能发生改变。

        解决方法:撤药

        5. 细胞状态改变

        原因:细胞状态变差时,状态也可能发生改变。主要是光泽度,透光度等。

        解决方法:查询培养条件是否合适,营养是否充足,检测是否有支原体污染等。

        6. 营养改变

        原因:缺少生长因子,胰岛素等添加物。

        解决方法:查询该细胞权威官方的培养条件(如ATCC),看是否缺少什么营养成分。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        您遇到的问题可能是由多种因素引起的,以下是一些可能导致细胞形态改变的常见因素:

        1.细胞污染:您提到细胞曾经检测为支原体阳性,这可能意味着细胞存在细菌、真菌、酵母等污染物。细胞污染会影响细胞形态、增殖和基因编辑等实验的准确性,所以需要确保细胞的纯度和质量。

        2.培养条件:细胞培养需要特定的培养基、培养温度、CO2浓度等条件。如果这些条件不合适,可能会导致细胞形态改变。建议检查一下您使用的培养基是否适合小鼠肾癌Renca细胞的培养,是否有适当的营养物质和生长因子。

        3.细胞老化:细胞在不断的分裂和增殖中会逐渐老化,导致细胞形态和功能的改变。如果您长时间培养同一批细胞,可能会遇到这种情况。建议定期检查细胞状态,并定期更换新的细胞株。

        4.其他因素:细胞形态的改变还可能受到细胞的营养状态、pH值、温度、氧气浓度等因素的影响。如果这些因素出现异常,也可能导致细胞形态的改变。

        为了解决这个问题,您可以尝试以下几个方面:

        1.进行彻底的污染检测,排除污染对细胞形态的影响。

        2.更换培养基、培养条件等,尝试找到最适合小鼠肾癌Renca细胞的培养条件。

        3.尝试更换细胞株,避免长时间使用同一批细胞。

        4.考虑其他可能的因素,如营养状态、pH值、温度等,尝试找到最适合的条件。

        希望这些建议可以帮助您解决问题。祝您实验顺利,毕业顺利!

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        细胞形态变化有可能是你消化过度导致的或者是老化了

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