实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问Annexin-FITC/PI染色结果异常

sswei

可能存在情况:1，细胞状态不好;2，细胞收集后存放的时间太长，没有及时染色;3，细胞表面原有的PS相对较多，应选用低浓度的AnnexinV标记;4，PBMC表面往往有血小板黏附在细胞表面，造成Annexin V阳性率偏高;5，过分吹打、震荡或胰酶消化等，可能使PS暴露出来。

4 回答610 围观

问EPC细胞（鲤上皮细胞）生长缓慢

loveliufudan

以下是一些可能有助于改善细胞生长缓慢的建议：培养基的配方和条件：确保培养基配方正确，含有必需的营养物质和适当的血清浓度。此外，细胞培养的环境也很重要，例如温度、CO2浓度、湿度等。细胞密度：细胞密度不足可能会导致生长缓慢。因此，您可以尝试调整细胞密度，以使细胞数量更多，有利于细胞生长和传代。培养容器的选择：选择适合EPC细胞生长的培养容器，如25cm2培养瓶或T25组织培养瓶。检查细胞状态：定期观

4 回答770 围观

问组织块细胞原代培养，是真菌污染么

sswei

细胞被污染，微生物则会大量繁衍，培育基就会迅速变黄、变混浊。污染包含细菌污染、支原体污染等。

3 回答365 围观

问【求助】annexin V /PI双染法测试肿瘤细胞凋亡

秋秋欣欣

消化之前也要收集培养基中的细胞。

4 回答429 围观

问神经元免疫荧光

loveliufudan

有以下几种可能性：神经胶质细胞：神经胶质细胞是神经系统中的非神经元细胞，它们可以围绕和支持神经元，并参与神经递质信号传递。在海马神经元染色时，神经胶质细胞也可能被染色，因此您观察到的一圈染色可能是这些细胞。血管：海马是一个高度血管化的区域，因此在染色时可能会发现周围的血管被染色。这些血管可能会形成一圈染色。其他细胞类型：除了神经胶质细胞和血管，还有其他一些类型的细胞可能在染色时被染色。例如，免疫细

3 回答1801 围观

问求助核质分离检测RNA定位的分析方法

土井挞克树

要获得如下表格1、导出PCR结果CT值到Excel2.结果导入GraphPad画图3.新建数据，选择Grouped，3个重复4.把Excel计算好的结果数值复制过来5.选择二维分组柱状图得到结果

1 回答708 围观

问样本量计算求助

loveliufudan

要比较A、B、C三种方法对同一样本的检出率，我们需要知道每种方法在多少个样本上进行了检测，并且需要将检测结果（+或-）记录下来。然后，可以使用以下公式来计算每种方法的敏感性和特异性：敏感性= TP / (TP + FN)特异性= TN / (TN + FP)其中，TP（True Positive）是指实际上阳性的样本被检测为阳性的数量，FN（False Negative）是指实际上阳性的样本被检测

3 回答655 围观

问样本量求助

sswei

计算患病率最小样本量需要考虑以下因素：1.置信水平：置信水平表示研究者对患病率的估计有多大的信心水平。常用的置信水平是95%或99%。2误差限：误差限表示研究者允许患病率的估计值和真实值之间的差异有多大。通常误差限的大小是以患病率的百分比为单位。3预期患病率：预期患病率是指研究者在进行样本量计算前已经确定的患病率。如果没有已知的患病率，则可以采用文献报道的患病率或进行先行研究获取患病率数据。根据上

2 回答294 围观

问Label free 定量蛋白质

loveliufudan

是否有必要需要视情况而定。以下是一些可能需要考虑的因素：实验目的：如果你的实验目的需要对蛋白质进行定量分析，并且需要比较样品之间的差异，那么做4D label free可能是必要的。样本类型：对于复杂的样本，如细胞或组织样本，可能需要用4D label free来克服样品中存在的复杂性。技术能力和经验：4D label free需要高级的技术能力和经验来正确分析数据。如果您或您的实验室没有相关的技

3 回答619 围观

问MEGA遗传距离矩阵怎么看

土井挞克树

是对应的，模型选择方面p-distance的成功率比较高

2 回答2976 围观

问求助，抗体混了甘油后还可以进行辣根酶标记吗

土井挞克树

可以的，纯化后可以进行辣根酶标记。

2 回答375 围观

问细菌基因组的两端拥有几条相同的基因，这是什么情况？

sswei

具启动子作用，具增强子作用，调控基因转录，含TATA序列等情况。

3 回答442 围观

问请教纤维素酶活测定，滤纸酶活(FPAase)

土井挞克树

考虑没有灭活完全，酶仍存在活性。

3 回答985 围观

问IntestiCult™ 类器官生长培养基（小鼠）的成分是什么？它和小鼠ENR培养基有何不同

土井挞克树

IntestiCult™ 类器官生长培养基(小鼠)是一种确定的无血清细胞培养基,用于有效建立和长期维持小鼠肠道类器官。

2 回答999 围观

问小鼠肠类器官培养一定要经过lgr5流式细胞分选吗，还是按操作用DPBS处理得到隐窝悬浮液？

土井挞克树

可以按操作用DPBS处理得到隐窝悬浮液后再做分选

2 回答472 围观

问我的适配体才36bp,要怎么设计引物

土井挞克树

有5'UTR和3'UTR，在这个两个区域设计引物，然后引物一定要有一部分在你的目的基因上，否则，很难判断你的扩增产物是不是你的目的基因的扩增产物

2 回答809 围观

问微生物与疾病关联的数据库

土井挞克树

研究微生物与疾病关联的数据库可以选择Peryton数据库

3 回答589 围观

问小鼠分离肠道隐窝要处理到哪种状态才能算分离完成呀，有图片可以看看吗

土井挞克树

要把肠道隐窝完整的暴露出来才算分离完成。

3 回答430 围观

问0.09%叠氮钠对培养的细胞有伤害么

sswei

1。叠氮钠并非对所有微生物都有效2。培养箱中会有少量氨气，影响细胞状态3。叠氮钠对人体有毒，使用者若接触到会受到危害4。叠氮钠有引发爆炸的潜在危险5。叠氮钠如接触到酸将产生剧毒气体。

5 回答1308 围观

问荧光染色问题，DAPI,凋亡等讨论

loveliufudan

DAP1 是一个在细胞质中发挥作用的蛋白质，其染色结果的质量可能会受到细胞状态的影响。如果细胞密度太低或者染色时间太短，可能会导致 DAP1 染色不均匀或者染色强度不足。因此，在进行 DAP1 染色时，需要控制好细胞密度和染色时间，以获得较为准确的染色结果。TUNEL 染色是一种用于检测凋亡细胞的方法，其染色结果主要出现在胞质中。如果 TUNEL 染色出现在胞质中而没有出现在核中，可能是细胞处理过

3 回答3302 围观

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