实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问慢病毒感染巨噬细胞没有荧光怎么办？

loveliufudan

可以尝试以下方法：优化MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）：不同的细胞类型可能需要不同的MOI。针对RAW264.7细胞，进行MOI梯度实验以确定最佳感染效果和细胞生长影响最小的MOI。使用增强感染试剂：在感染过程中添加增强感染试剂，如Polybrene，可以提高感染效率。请注意选择适当的浓度，避免对细胞产生毒性。调整病毒接触时间：增加病毒与细胞接触的时间。通常，

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问细胞培养（脂肪细胞）问题求助？

Luckybabygirl

说明长得很好，但也要注意一下器材，比如细胞培养，你有没有什么问题或者有没有漏液等问题，如果都没有的话，勤换液就可以了

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问HE高清染色，伊红不着色，染色液刚换的，这是什么原因怎么解决

loveliufudan

可能是有以下原因：伊红染色液过度稀释：伊红染色液如果过度稀释，也会导致染色效果不佳。样本处理不当：如果样本在制备过程中没有经过充分的固定和脱水，或者在染色前未经过充分的去蜡处理，也会影响伊红的染色效果。

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问怎么去做细菌吸光度-浓度试验？

loveliufudan

可能是由于初始菌悬液浓度较高，即使经过多次稀释，菌落数仍然过多。为了在实验中获得合适的菌落数，可以尝试以下步骤：首先准备适当浓度的菌悬液，使其吸光度（通常在600 nm处测量）约为0.1。这可以通过进一步稀释初始菌悬液来实现。例如，可以尝试将初始菌悬液与无菌生理盐水按1:9的比例混合，然后再测量吸光度。根据需要进行适当调整。当吸光度调整到合适的范围后，继续进行逐级稀释。例如，可以尝试进行10^4、

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问细胞复苏3天后出现这种黄色斑块的是污染吗？培养基不混浊，但感觉细胞生长比较缓慢，不确定这是不是污染

汤姆卜丽波

像是霉菌，细胞状态也不太好，你试着下次复苏加一点三抗

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问求助International Journal of Older People Nursing期刊投稿

huarenqiang5

和其他期刊流程差不多的，先初审再外审

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问AKTA纯化蛋白所用的缓冲液A、B液和脱盐液请问配方是什么

loveliufudan

缓冲液A和缓冲液B的具体配方以及脱盐液的配方取决于你的纯化策略和目标蛋白质的特性。以下是一些常见的配方：1.离子交换层析：缓冲液A（低离子强度缓冲液）：20 mM Tris-HCl，pH 8.0缓冲液B（高离子强度缓冲液）：20 mM Tris-HCl，pH 8.01 M NaCl脱盐液（用于对蛋白进行脱盐）：20 mM Tris-HCl，pH 8.02.亲和层析（如Ni-NTA层析）：缓冲液A（

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问染色体制片效果和实验室温湿度等环境因素的关系？

loveliufudan

环境因素确实可能影响到细胞制片过程中的质量。温度、湿度和环境稳定性在染色体制片过程中起着重要作用。以下是一些建议，以帮助您改善制片质量和避免外界因素的影响：控制实验室环境：在进行染色体制片实验时，尽量保持实验室温度和湿度相对稳定。如果可能，为实验室安装空调和加湿器以保持恒定的温度和湿度。在恶劣天气条件下（如高湿度），尽量避免进行实验。标准化固定液浓度：在制片过程中，确保使用适当浓度的固定液。过高或

2 回答1498 围观

问外周血样本进行单细胞测序，如何保持样本活性最大，取样过程应注意什么？

loveliufudan

进行单细胞测序需要采集外周血细胞样本，并且在样本采集和处理过程中，保持细胞活性和完整性是非常重要的。以下是一些关于如何保持样本活性最大和取样过程应注意的建议：1.采集新鲜样本：尽可能采集新鲜的血液样本，避免长时间存放或运输，这会降低细胞的活性和完整性。2.使用无菌技术：在取样和处理样本的过程中，应该使用无菌技术，避免任何细菌或病毒污染样本。3.使用合适的抗凝剂：血液样本在采集后需要立即加入合适的抗

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问微流控制备双层液滴有什么要点吗？

loveliufudan

以下是一些建议和注意事项，供您参考：1.毛细管的尖端距离：尖端距离需要适中，以保持液滴的稳定性并防止两个液滴之间的过早融合。通常，根据实验液相的流速和流动性，尖端距离可以在0.5至3 mm之间进行调整。建议先使用较大的距离开始尝试，并在实验中逐步调整以获得最佳结果。2.调整流速：在进行液滴制备时，内外相和中间相的流速会影响液滴的形成。请确保内相和外相的流速适中，以使液滴能够在毛细管尖端正常形成。您

2 回答430 围观

问小鼠细胞培养过程中，换培养瓶后，发现培养瓶底部有模糊的黄褐色絮状物，这是什么原因造成的？

土井挞克树

黄褐色絮状物可能是细胞培养底部缺氧造成的细胞无氧代谢产物，建议及时给细胞换液清除黄褐色沉淀。

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问扩增1800bp左右cds区全长扩不出来，如果分段设计引物怎么弄？

loveliufudan

可以尝试分段设计引物来扩增。一般而言，可以根据CDS区域的序列信息，设计多对重叠的引物，将CDS区域分成较短的几段，每段长度不超过1000bp，然后逐段扩增。以下是一些分段扩增的建议：确定CDS区域的边界。可以通过查阅文献、数据库或者基因注释信息等方式获取。分段设计引物。选择多对引物，每对引物的长度应在18-24 bp之间，GC含量应在40-60%之间。引物的Tm值应该尽可能接近，以避免温度差异对

3 回答3899 围观

问MDA-MB-453,BT474,SKBR-3，JIMT-1 细胞周期分别怎么样啊，多久传一次代，几天换一次液呀？

汤姆卜丽波

这几个我们课题组有人在养，一般都是两天传代，一传二，换液就是什么时候培养基黄了就换

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问对动物进行病毒感染实验，可以通过哪些指标来判断动物对病毒的易感性？

蓝莓小布丁

动物受到病毒感染的时候，因为病毒种类的不一样，血常规的指标也会有所不同。但一般来说常见的白细胞，淋巴细胞，中性粒细胞，单核细胞，血小板等指标检测综合起来可以判断病毒易感情况。

1 回答407 围观

问请问大家这个蛋白上样量再怎么调整吖？

汤姆卜丽波

我觉得多个一两微升不至于变化这么大，有可能是你蛋白降解了，重新提过保证蛋白浓度再跑

3 回答361 围观

问ILC2与肝星状细胞如何共培养？用何种方法

loveliufudan

以下是一个简单的共培养方法。1.准备细胞培养物品培养基（如DMEM）肝星状细胞和LX-2细胞胎牛血清（FBS）1%抗生素-抗真菌药（如青霉素-链霉素）细胞培养板或培养瓶细胞计数器或血球计数板2.分离和计数细胞从原代或传代肝星状细胞中分离出细胞计算肝星状细胞和LX-2细胞的数量3.培养基的制备为共培养的细胞制备含10% FBS和1%抗生素-抗真菌药的培养基。4.共培养根据实验设计，在同一细胞培养板或

2 回答415 围观

问血液病患者治愈后如果备孕，应该选择哪些细胞遗传学检查？

loveliufudan

在后续备孕时，建议白血病等经骨髓移植治愈的血液病患者选择孵化时间较长的胚胎移植，以减少供者的遗传物质对结果的影响。此外，可以选择以下标本类型和检验方法：无创产前基因检测（NIPT）：通过孕妇血液中的胎儿游离DNA进行检测，不需要对胎儿进行取样，避免了胎儿的伤害，同时也减少了供者遗传物质的干扰。组织细胞型分析（Karyotyping）：通过对胎儿羊水或绒毛取样，检测供者的遗传物质，确定胎儿是否存在染

3 回答514 围观

问基因过表达成功但细胞迁移或增殖就是没趋势是否可以判定该基因不具有相应功能？

loveliufudan

仅仅通过基因过表达成功但细胞迁移或增殖没有趋势，不能完全判定该基因不具有相应功能。这可能是由于多种原因导致的，如实验条件、细胞类型、转染方法、检测方法等等。首先，建议检查实验条件是否一致，例如培养基是否相同，细胞密度是否一致，细胞处理时间是否相同等等，这些因素对实验结果会有很大的影响。其次，细胞类型可能对实验结果有较大的影响。不同细胞类型在迁移和增殖的能力上存在很大的差异，因此可能需要在不同的细胞

3 回答828 围观

问大鼠CD4+ T细胞分离和培养问题求助？

sswei

可以选用磁珠分离CD4+T细胞较好。体外培养基是用RPMI-1640

3 回答906 围观

问转导后的CHO-K1，想问一下这是细胞碎片还是污染了？

sswei

在细胞培育的过程中发现有黑点生成，在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点呈现前相比。没有任何变化，那么，黑点的呈现可能与细胞生长过老，破碎的细胞残骸有关。

3 回答483 围观

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