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实验问答

23,133,119 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问组织固定完，脱水到百分之多少的乙醇，就可以保存在-20了啊

Dr_劉医生

一般到60%就可以保存了，乙醇低于50%基本就没有脱水能力了

3 回答444 围观

问做定点突变，第一步中，目标质粒扩增，扩增的是质粒中的目的片段还是质粒载体+目的片段

loveliufudan

在做定点突变的第一步中，我们需要对目标质粒进行扩增。扩增的是整个质粒，包括质粒载体和目的片段。通过PCR扩增，我们可以获得大量的质粒DNA。在后续步骤中，我们会引入定点突变，然后将突变的质粒进行转化、筛选和鉴定。

3 回答895 围观

问荧光定量PCR中内标定量是如何使用内标定量的？内标浓度和样本浓度之间的公式是什么？怎么确定这个公式？

Dr_劉医生

其中，Csample是样品中待测组分的浓度，CIS是内标物的浓度，Asample是样品中待测组分的峰面积，AIS是内标物的峰面积，Astandard是对照品的峰面积。

2 回答808 围观

问慢病毒感染巨噬细胞没有荧光怎么办？

loveliufudan

可以尝试以下方法：优化MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）：不同的细胞类型可能需要不同的MOI。针对RAW264.7细胞，进行MOI梯度实验以确定最佳感染效果和细胞生长影响最小的MOI。使用增强感染试剂：在感染过程中添加增强感染试剂，如Polybrene，可以提高感染效率。请注意选择适当的浓度，避免对细胞产生毒性。调整病毒接触时间：增加病毒与细胞接触的时间。通常，

2 回答1062 围观

问细胞培养（脂肪细胞）问题求助？

Luckybabygirl

说明长得很好，但也要注意一下器材，比如细胞培养，你有没有什么问题或者有没有漏液等问题，如果都没有的话，勤换液就可以了

3 回答224 围观

问vp实验及甲基红实验的注意事项

loveliufudan

VP实验注意事项：1.保证试剂的新鲜度：试剂的质量对实验结果具有重要影响。使用新鲜的巴拉特试剂A（α-萘乙醇）和巴拉特试剂B（40% KOH溶液）。2.掌握试剂的添加顺序：先加入试剂A，再加入试剂B。注意不要将试剂混合后一起加入。3.加入试剂后摇匀：试剂加入后要摇匀，然后等待一段时间（通常约15分钟）观察颜色变化。4.观察时间：颜色变化可能在几分钟到1小时之间出现，因此需要密切观察。结果的判断以红

3 回答2957 围观

问ALDOA的基因全敲鼠

Dr_劉医生

全敲会导致胚胎发育受限，也会出现新生小鼠死亡。可以读读这两篇文献：《Aldolase A regulates T H 1/T H 2 cell differentiation and proliferation in vitro and in vivo》《Aldolase A regulates actin cytoskeleton via profilin binding in cell spr

3 回答706 围观

问细胞复苏3天后出现这种黄色斑块的是污染吗？培养基不混浊，但感觉细胞生长比较缓慢，不确定这是不是污染

汤姆卜丽波

像是霉菌，细胞状态也不太好，你试着下次复苏加一点三抗

4 回答705 围观

问求助International Journal of Older People Nursing期刊投稿

huarenqiang5

和其他期刊流程差不多的，先初审再外审

3 回答211 围观

问小鼠细胞培养过程中，换培养瓶后，发现培养瓶底部有模糊的黄褐色絮状物，这是什么原因造成的？

土井挞克树

黄褐色絮状物可能是细胞培养底部缺氧造成的细胞无氧代谢产物，建议及时给细胞换液清除黄褐色沉淀。

3 回答552 围观

问用人血做pcr，是用血浆还是全血还是血清比较好呢？

汤姆卜丽波

我们一般都是用血清做的，直接采血然后取血清

3 回答5014 围观

问扩增1800bp左右cds区全长扩不出来，如果分段设计引物怎么弄？

loveliufudan

可以尝试分段设计引物来扩增。一般而言，可以根据CDS区域的序列信息，设计多对重叠的引物，将CDS区域分成较短的几段，每段长度不超过1000bp，然后逐段扩增。以下是一些分段扩增的建议：确定CDS区域的边界。可以通过查阅文献、数据库或者基因注释信息等方式获取。分段设计引物。选择多对引物，每对引物的长度应在18-24 bp之间，GC含量应在40-60%之间。引物的Tm值应该尽可能接近，以避免温度差异对

3 回答3976 围观

问请问工程菌进行菌落pcr无条带是为什么？

汤姆卜丽波

全都没有那很可能是你的引物用的有问题，因为最起码2该有

3 回答1311 围观

问MDA-MB-453,BT474,SKBR-3，JIMT-1 细胞周期分别怎么样啊，多久传一次代，几天换一次液呀？

汤姆卜丽波

这几个我们课题组有人在养，一般都是两天传代，一传二，换液就是什么时候培养基黄了就换

2 回答362 围观

问请问大家这个蛋白上样量再怎么调整吖？

汤姆卜丽波

我觉得多个一两微升不至于变化这么大，有可能是你蛋白降解了，重新提过保证蛋白浓度再跑

3 回答368 围观

问ILC2与肝星状细胞如何共培养？用何种方法

loveliufudan

以下是一个简单的共培养方法。1.准备细胞培养物品培养基（如DMEM）肝星状细胞和LX-2细胞胎牛血清（FBS）1%抗生素-抗真菌药（如青霉素-链霉素）细胞培养板或培养瓶细胞计数器或血球计数板2.分离和计数细胞从原代或传代肝星状细胞中分离出细胞计算肝星状细胞和LX-2细胞的数量3.培养基的制备为共培养的细胞制备含10% FBS和1%抗生素-抗真菌药的培养基。4.共培养根据实验设计，在同一细胞培养板或

2 回答436 围观

问血液病患者治愈后如果备孕，应该选择哪些细胞遗传学检查？

loveliufudan

在后续备孕时，建议白血病等经骨髓移植治愈的血液病患者选择孵化时间较长的胚胎移植，以减少供者的遗传物质对结果的影响。此外，可以选择以下标本类型和检验方法：无创产前基因检测（NIPT）：通过孕妇血液中的胎儿游离DNA进行检测，不需要对胎儿进行取样，避免了胎儿的伤害，同时也减少了供者遗传物质的干扰。组织细胞型分析（Karyotyping）：通过对胎儿羊水或绒毛取样，检测供者的遗传物质，确定胎儿是否存在染

3 回答525 围观

问基因过表达成功但细胞迁移或增殖就是没趋势是否可以判定该基因不具有相应功能？

loveliufudan

仅仅通过基因过表达成功但细胞迁移或增殖没有趋势，不能完全判定该基因不具有相应功能。这可能是由于多种原因导致的，如实验条件、细胞类型、转染方法、检测方法等等。首先，建议检查实验条件是否一致，例如培养基是否相同，细胞密度是否一致，细胞处理时间是否相同等等，这些因素对实验结果会有很大的影响。其次，细胞类型可能对实验结果有较大的影响。不同细胞类型在迁移和增殖的能力上存在很大的差异，因此可能需要在不同的细胞

3 回答844 围观

问大鼠CD4+ T细胞分离和培养问题求助？

sswei

可以选用磁珠分离CD4+T细胞较好。体外培养基是用RPMI-1640

3 回答930 围观

问转导后的CHO-K1，想问一下这是细胞碎片还是污染了？

sswei

在细胞培育的过程中发现有黑点生成，在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点呈现前相比。没有任何变化，那么，黑点的呈现可能与细胞生长过老，破碎的细胞残骸有关。

3 回答492 围观

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