实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问病毒感染细胞，药物在有抗病毒作用下，如何证明其对炎症机制的直接作用？

土井挞克树

建议增加对照组，对照组不加药物直接验证抗炎作用

2 回答414 围观

问如果用流感病毒假病毒感染巨噬细胞，能引起细胞因子的分泌吗？

土井挞克树

可以的，假病毒也是可以引起细胞因子分泌的

2 回答463 围观

问冈田酸如何溶解能让DMSO<0.1%并且不析出？

土井挞克树

把dmso稀释后润洗就可以不析出了。

1 回答314 围观

问分离血浆后接着分离pbmc

土井挞克树

1500r，时间设置为3-5min

3 回答1952 围观

问ntsys软件做树状图

土井挞克树

把软件卸载后重新安装一下再做。

2 回答542 围观

问怎么计算细菌的最低CFU呀

loveliufudan

确定细菌的最低可计数单位（Colony Forming Units，CFU）需要进行稀释系列和平板计数实验。这是一项基本的实验技术，以下是一般的操作步骤和计算方法：1. 准备稀释液：选择适当的稀释液（例如，无菌生理盐水或缓冲液）来稀释细菌悬浮液。最常用的是进行10倍的稀释，以确保适当的计数范围。2. 稀释样本：取一定体积的细菌悬浮液（通常是0.1 mL）加入到稀释液中，并进行充分混合。3. 进行连

2 回答993 围观

问PD-1/PD-L1通路

土井挞克树

因为pd-1可以负反馈调节t细胞的功能

2 回答495 围观

问96孔板药物浓度怎么算

土井挞克树

你可能稀释多了一倍水。建议重新稀释

2 回答1226 围观

问hacat细胞炎症模型造不出来

土井挞克树

早期先降低肿瘤坏死因子的浓度，然后后期再增加

2 回答2035 围观

问LDH释放试验死亡细胞的类型

土井挞克树

LDH释放实验只能证明死亡，如果想看死亡途径还需要继续添加辅助实验证明死亡途径

2 回答1840 围观

问目的基因对下游影响

土井挞克树

考虑目的基因对下游信号有双重调节，建议固定实验条件后先探索一条通路。

2 回答705 围观

问CAF肿瘤相关成纤维细胞

土井挞克树

二型胶原靶向肽WYRGRL有靶向CAF的作用

2 回答444 围观

问孟德尔入门求助

土井挞克树

考虑文件损坏，试一下卸载重新安装

2 回答756 围观

问细胞抗氧化酶活SOD、CAT

土井挞克树

有可能出现的，比如损伤组损伤过度就会出现这种情况

2 回答898 围观

问真菌培育

土井挞克树

可以直接将菌丝培育到培养基上。

2 回答924 围观

问转染过表达或敲低，看到荧光，就是上调下调不起作用，是什么问题

土井挞克树

上下调不起作用可能是调节蛋白存在降解或聚合，这种情况不影响荧光表现，但上下调会不起作用

5 回答726 围观

问请问做透析袋试验，怎样能做到最好的密封，用棉线扎和用透析袋夹哪个更好？

sswei

用透析袋试验，用透析袋夹密封更好。

4 回答578 围观

问磷酸化的p-PI3K条带好淡，怎么才能跑出好的条带呢？

sswei

因为磷酸化蛋白只占总蛋白量的极少部分，加入一抗后最好4℃过夜，保证抗体有充分的结合时间。4℃也可以使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化抗体都挺贵的。二抗则室温1h即可。4℃过夜，主要原因不是使抗体结合更好，而是蛋白抗原不容易从膜上脱落。蛋白抗原在膜上靠的是物理吸附属热力学范畴，高温下容易脱落。磷酸化蛋白WB时，用洗涤液漂洗时也要注意一下，摇床的转速不要太快，洗的时间不要太长，孵育一抗和二抗之后分别洗3次

3 回答1929 围观

问引物保存方法

sswei

引物合成后，经过一系列处理和纯化步骤，旋转干燥而成片状物质。没有溶解的引物非常稳定，-20℃下可保存2-3年，甚至更长。溶解后的引物-20℃下避免反复冻融，可以保存至少半年以上。如果对实验的重复性要求较高，合成的OD值较大，建议将溶解好的引物事先稀释为100μmol/L的储存液，分装数份保存于-20℃冰箱。使用前，将浓溶液稀释成工作液（10pmol/μl或20pmol/μl）后进行实验。修饰荧光引

4 回答9619 围观

问老鼠皮瓣实验

sswei

供应皮瓣的动脉血管没有离断，导致皮瓣存活。

3 回答307 围观

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