实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问求问各位前辈斑马鱼注射用针问题！

土井挞克树

可以用凝胶固定斑马鱼，然后选用小口径针进行注射

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问骨骼肌组织病理为什么间隙变大

loveliufudan

骨骼肌组织的间隙增大可以有多种原因，以下是一些可能的解释： 1. 肌纤维退变：肌纤维退变是一种肌肉疾病，其中肌肉纤维逐渐变得异常或丧失，导致组织的结构和功能受损。在肌纤维退变过程中，肌纤维可能变薄或丧失，导致组织间隙增大。 2. 细胞水肿：细胞水肿是由于细胞内液体积的增加而引起的细胞膨胀。当骨骼肌组织发生细胞水肿时，细胞内的液体聚集，导致组织间隙增大。 3. 炎症反应：骨骼肌组织的炎症反应可能导致

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问RNA提取为什么DNA和蛋白质在中间层和下层即有机相，而RNA在水相

loveliufudan

在常规的RNA提取过程中，细胞或组织样品首先被裂解，细胞膜和核膜被破坏，释放出细胞内的各种分子。随后，加入酚酸混合物（例如酚/氯仿），形成两个相，其中有机相和水相。这种分离主要是由于酚酸混合物的化学特性和密度差异所致。酚酸混合物中的酚主要与蛋白质相互作用，形成酚蛋白复合物，使蛋白质沉淀到有机相中。另一方面，RNA与水相中的水结合，形成水相中的RNA溶液。DNA和RNA的相互作用性质不同，导致它们在

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问实验室有工作浓度的胰酶，但不知道胰酶10ug/ml怎么算，1ml中要加多少ul

huarenqiang5

如果是10ug/ml，那么1ml中就需要加10ul。

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问检测到大肠杆菌细胞外比细胞内含有Pyl的蛋白质含量多是为什么？

dxyc42u

很可能是细胞内产生的蛋白分泌到细胞外了

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问病毒攻毒后1.5小时，细胞全部悬浮，是病毒液浓度太高了吗，还是什么原因，怎么办

loveliufudan

当细胞在病毒攻毒后短时间内全部悬浮，有以下几种可能的原因： 1. 细胞溶解/破裂：高浓度的病毒感染可能导致细胞溶解或破裂，从而导致细胞完全悬浮。这可能是由于病毒感染引起的细胞损伤和破坏。 2. 细胞凋亡：某些病毒感染可能导致细胞凋亡（程序性细胞死亡），从而使细胞脱离底物并悬浮在培养基中。这可能是病毒感染对细胞的特定效应之一。 3. 病毒复制和释放：高浓度的病毒攻毒可能导致病毒在细胞内大量复制和积累

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问在-20冻存三到四个月的血清并且解冻过一次可以用ELISA测细胞因子吗，比如IFN-γ，白细胞介素10等

loveliufudan

在-20°C冻存三到四个月的血清样品通常是可以使用的，但是解冻次数可能会对样品的质量和稳定性产生影响。多次解冻可能导致细胞因子的活性和浓度发生变化，从而影响ELISA测定的准确性和可靠性。对于ELISA测定细胞因子，建议使用新鲜的血清样品或经过少数解冻的样品，以确保细胞因子的活性和稳定性。如果样品已经解冻多次，并且存放时间较长，细胞因子的活性可能会下降，浓度可能会发生变化。此外，不同的细胞因子可能

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问请教哪个杂志投稿时不需要提交western blot 3张原图的？

huarenqiang5

sci都必须要提交原图，建议你投其他杂志。

3 回答2386 围观

问关于组织保存问题

无敌大虫子

收集标本后放在-80度冰箱里，随时都可以拿出来解冻使用

7 回答3294 围观

问Lewis肺癌细胞表达CCR5吗？

dxyc42u

Lewis肺癌细胞表达CCR5，但是表达很低

2 回答296 围观

问求教ATDC5诱导的protocol，以及ATDC5转染相关的问题

loveliufudan

在终止诱导后，一般情况下是不需要继续添加诱导剂来维持稳定的表型。诱导剂的作用是通过激活或抑制特定的信号通路或基因表达来引导细胞向特定的分化状态转变。一旦终止诱导，不再添加诱导剂的话，细胞会逐渐恢复其基础状态。关于ATDC5细胞的问题，ATDC5细胞是一种常用的诱导成软骨细胞的细胞系。一般情况下，可以通过给予适当的诱导剂（如Insulin、Dexamethasone和Ascorbic acid等）来

3 回答1046 围观

问【求助】海马HE染色图片观察

loveliufudan

在观察海马组织的HE染色时，以下是一些常见的结构和细胞类型，您可以关注和识别它们： 1. 锥体神经元（pyramidal neurons）：海马区域含有许多锥体神经元，它们是典型的海马结构。锥体神经元通常呈现金字塔形状，具有长而突出的轴突和多个树突。它们是海马功能的主要细胞类型。 2. 颗粒细胞（granule cells）：颗粒细胞是海马中的另一种主要细胞类型。它们较小且较圆形，通常位于海马回的

3 回答10250 围观

问小分子蛋白电泳跑不出来

dxyc42u

电压到没啥问题，可以继续延长时间，比如过夜转膜

4 回答661 围观

问同一种菌，同一块板，菌落形态发生改变！

dxy_jr2k4kye

肉眼看的话确实属于不同形态的菌，建议挑单菌落做16s pcr，与此同时，将单菌落进行三区画板，得到纯菌，根据测序结果再进行保菌和进一步分析；如果单菌落测16s测出来的是双向重叠峰的话，建议多次纯化，直到测序结果正常一致！祝实验顺利！

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问【实验求助】各位大佬，请教HFF-1细胞形态改变

土井挞克树

传代久了就会导致细胞形态改变，重新传代，然后选用早期的细胞实验

3 回答915 围观

问这个WB图怎么看，CASP和cCASP结果为什么不一样

dxyc42u

应该是抗体的原因，排查下抗体有没有问题

2 回答241 围观

问为什么coip中ip组对照组和处理组与input组蛋白结果相反？

dxyc42u

确认实验操作没啥问题的话，很有可能是把样本搞混了

3 回答746 围观

问PCR产物胶回收后仍有杂带是怎么回事

李振阳遗传

是不是你切胶的时候没有切干净把杂带也裁进去了

5 回答3267 围观

问基因组DNA做PCR时，最下面很亮的带是什么啊

李振阳遗传

你如果是基因组dna的话考虑一下是否断裂

7 回答1535 围观

问蛋白质溶液中加入丙酮来沉淀蛋白会导致蛋白质变性吗

dxyc42u

一般来说是会导致一些蛋白变性的

4 回答2491 围观

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