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实验问答

23,098,210 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问每个杯的时间设置有要求吗？

sswei

可能与仪器工作环境，杯的放置位置正确与否等有关。

3 回答429 围观

问实验求助|IFN-γ诱导肿瘤细胞PD-L1表达

loveliufudan

如果您的目标是研究药物处理对PD-L1表达的影响，您可以在药物处理期间不再加入IFN-v，以观察药物对PD-L1表达的直接效应。然而，如果您希望模拟特定的生理条件或研究IFN-v与药物处理的相互作用，您可能需要在药物处理期间继续加入IFN-v。

3 回答413 围观

问提原代污染了吗？

skyye

长梭形的、触角长长的比较像是成纤维细胞。如果是支原体污染的话细胞生长缓慢或基本不生长，镜下很难鉴别，一般需要取上清做PCR才能鉴别是否有支原体污染。另外请问你是提血管内皮细胞还是什么细胞呢？

3 回答410 围观

问怎么理解适应性免疫的特点：耐受性

loveliufudan

适应性免疫的”耐受性”指的是免疫系统对于它自身正常组织的容忍能力。适应性免疫系统在识别和攻击外来抗原的同时，也需要保持对自身组织的不攻击，以防止自身免疫疾病的发生。适应性免疫的耐受性是通过多种机制来实现的。这些机制包括： 1. 免疫耐受的建立：在胚胎发育和早期生命阶段，免疫系统会受到调节，以识别和容忍自身组织。这个过程中的异常可能导致免疫系统攻击自身组织，引发自身免疫疾病。 2. 免疫耐受的维持：

3 回答2132 围观

问细胞培养过程中出现黑胶虫污染怎么解决

loveliufudan

细胞培养过程中出现黑胶虫污染是一种常见的问题，但可以采取一些措施来解决这个问题： 1. 隔离受污染的细胞：首先，将受污染的细胞与其他未受污染的细胞隔离开来，以防止进一步传播。 2. 清除污染源：检查培养皿、培养瓶、培养基和培养室等，找出可能引起污染的源头。对受污染的培养皿或瓶子进行处理或清洗。 3. 更换培养基：将细胞转移到新的培养基中，确保培养基不被污染源所影响。 4. 清洁培养设备：对培养皿、

4 回答907 围观

问使用硫酸铵进行盐析，无沉淀析出

loveliufudan

胶原蛋白的提取和析出可能受多种因素影响，以下是一些可能导致你没有得到期望沉淀的原因： 1. 样品源问题：可能是你的初始材料中胶原蛋白的含量较低，或者在提取过程中胶原蛋白已经被破坏或降解。 2. 盐析条件：硫酸铵的浓度对蛋白质的沉淀有很大影响。如果硫酸铵的浓度过高或过低，可能会影响胶原蛋白的析出。在这种情况下，可能需要调整硫酸铵的浓度。 3. pH和温度：胶原蛋白在一定的pH和温度范围内稳定。如果条

3 回答1675 围观

问wb真的是玄学—wb条带不均匀

skyye

这个首先还是考虑是胶不均匀的问题。配胶时各成分需要充分混匀，配好胶后尽快使用，在4℃保存不超过一周

4 回答1905 围观

问自噬流判断

loveliufudan

LC3-II/1和p62的下调以及AMPK和beclin1的上调提示细胞可能正在经历自噬的激活和执行自噬过程。在自噬过程中，LC3-I会转化为LC3-II，而p62是一种与自噬相关的蛋白质，负责将被自噬降解的蛋白质和细胞器与自噬体结合。因此，LC3-II/1的下调和p62的下调暗示着自噬活动的增加，可能导致了细胞内废弃物的降解和清除。同时，AMPK（AMP-activated protein ki

3 回答1024 围观

问WB内参

skyye

右边一组的情况我没遇到过，但确实每次上样前需要将样本在室温下充分溶解并短暂离心。左边一组的话，第二个和第三个样的内参不齐，也可能跟测蛋白浓度时没测准导致的

4 回答374 围观

问请教肿瘤细胞成球实验出现黄色球体是什么

loveliufudan

黄色球体的出现可能是由于肿瘤细胞内部脂质的积累，脂质积累可以是由于细胞内脂质代谢异常或脂质包裹的细胞内组分。

3 回答761 围观

问细胞复苏肿瘤细胞复苏后为什么里面有小黑点杂质

loveliufudan

肿瘤细胞复苏后出现小黑点杂质的原因可能有多种可能性，其中一些常见的解释包括： 1. 细胞碎片：在细胞复苏过程中，一些细胞可能会经历凋亡或破裂，产生碎片。这些碎片可能在细胞复苏后的培养物中存在，呈现为小黑点杂质。 2. 细胞内含物：某些细胞内含物，如细胞器的残余部分、内部膜片段或其他细胞成分的残余，可能在细胞复苏后仍然存在，并形成小黑点杂质。 3. 培养物污染：在细胞复苏和培养的过程中，可能会发生细

4 回答1480 围观

问细胞复苏细胞复苏后为什么有小的杂质

李树堂ZW3H

可能是支原体，加200微升四环素应该就可以了，或者换液培养观察几天再看看，可能会有改善

4 回答647 围观

问转染vs拯救病毒是什么意思？具体如何操作？

土井挞克树

一种方法是构建病毒的感染性克隆，并以此为模板合成病毒的RNA，通过转染合适的宿主细胞来拯救病毒。另一种方法是通过将病毒的基因组cDNA克隆到质粒载体，并转染易感细胞获得拯救病毒

3 回答2788 围观

问sf9细胞进行杆状病毒（杆粒）转染，需要注意哪些？

loveliufudan

在使用SF9细胞进行杆状病毒（Baculovirus）转染时，以下是一些需要注意的关键点： 1. 细胞培养条件：确保SF9细胞在转染前处于健康、活跃和适当的生长状态。细胞培养基的配方和培养条件应符合SF9细胞的要求，如适当的培养温度（通常为27-28°C）和培养时间。 2. 转染载体和病毒：选择适当的转染载体（如质粒DNA）和杆状病毒背景，以实现所需的蛋白表达。确保转染载体包含目标基因的正确构建，

3 回答2688 围观

问家人们，用台盼蓝测细胞密度的时候机器显示死细胞98%，活细胞只有2%，明明可以贴壁生长，到底哪一步出问题了呢？

loveliufudan

是不是检测方法有问题，如果使用不正确或不适合的染色方法，可能会导致误判。

3 回答353 围观

问sf9昆虫细胞对数生长期时的细胞密度怎样才能知道？sf9刚复苏培养F1代细胞悬浮的细胞是死亡的细胞还是部分悬浮细胞？

土井挞克树

sf9刚复苏培养f1代细胞是部分悬浮细胞，并不是全部死亡

3 回答411 围观

问THP-1细胞诱导成M0细胞再诱导成M2细胞，如何进行消化呢？

loveliufudan

对于THP-1细胞，酶消化可能不是最适合的方法。您可以尝试使用细胞刮取的方法，使用细胞刮片或细胞刮棒轻轻刮取细胞以实现细胞的离解。

4 回答1022 围观

问请问各位大神，抑制剂梯度处理细胞时候DMSO对照组应该怎么设置呢？

loveliufudan

DMSO对照组的设置通常是将DMSO单独作为一个组进行处理，以评估DMSO本身对实验结果的影响。这样可以比较其他药物组和DMSO对照组之间的差异。在药物梯度处理细胞时，DMSO对照组可以选择与最高浓度的药物处理组体积相同的DMSO体积。这样可以保持处理组和对照组在处理液体积上的一致性，从而更好地比较它们之间的效果差异。需要注意的是，高浓度的药物相对于低浓度的药物可能更容易析出，但在实验设计中，我们

4 回答4313 围观

问动物实验分正常对照，模型，和低中高剂量药物组。

balalaLy

所有组加的pbs体积都应该一致，只是药物组的药物剂量按照低中高的剂量，但体积都要保持相等。

5 回答1350 围观

问求助｜茜素红染色怎样诱导细胞到21天？

skyye

我养的BMSC也碰到过类似情况。这种情况可以提前用多聚赖氨酸或明胶包被孔板，然后再种板。另外换液时尽量轻打在侧壁上，避免直接影响了底部细胞

2 回答516 围观

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