实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问每个杯的时间设置有要求吗？

sswei

可能与仪器工作环境，杯的放置位置正确与否等有关。

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问提原代污染了吗？

skyye

长梭形的、触角长长的比较像是成纤维细胞。如果是支原体污染的话细胞生长缓慢或基本不生长，镜下很难鉴别，一般需要取上清做PCR才能鉴别是否有支原体污染。另外请问你是提血管内皮细胞还是什么细胞呢？

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问小鼠th细胞养殖

土井挞克树

加入血清再养养看，提高血清浓度

1 回答502 围观

问求助一下

土井挞克树

细胞膜被破坏荧光值是会升高的。

1 回答384 围观

问wb真的是玄学—wb条带不均匀

skyye

这个首先还是考虑是胶不均匀的问题。配胶时各成分需要充分混匀，配好胶后尽快使用，在4℃保存不超过一周

4 回答1863 围观

问大佬们求助！在养脑肿瘤细胞，背景呈沙子状，已经复苏好几管了还是这样

sswei

细胞培养己污染，需要重新培养了。

3 回答450 围观

问WB内参

skyye

右边一组的情况我没遇到过，但确实每次上样前需要将样本在室温下充分溶解并短暂离心。左边一组的话，第二个和第三个样的内参不齐，也可能跟测蛋白浓度时没测准导致的

4 回答361 围观

问细胞复苏细胞复苏后为什么有小的杂质

李树堂ZW3H

可能是支原体，加200微升四环素应该就可以了，或者换液培养观察几天再看看，可能会有改善

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问石蜡切片制作时为什么切片组织总有横向裂缝 ?

sswei

做石蜡切片过程中，有裂纹可以考虑以下方面： 1.石蜡包埋时温度设置的比较高，如>70℃，容易导致组织变脆，组织变硬，切片时容易产生裂纹 2.前期的脱水透明部分，浸泡时间久，容易导致组织变脆 3.刀片：有一次切片时组织一直碎，换了新的刀片之后就切出了完整的切片 4.转动手柄的速度：不要太慢，速度要均匀适中，可以多切一些再展片 5.展片的温度：如果组织展片过程中易碎，可以调整一下展片的温度

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问组织体内磺胺嘧啶浓度测定

土井挞克树

可能是产物重氮盐，重氮盐进一步与β-萘酚发生偶合反应，生成由橙黄到猩红色的沉淀。

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问多肽浓度测定方法的选择及相关问题

huarenqiang5

这种情况一般使用BCA法进行测定，两种方法的对比如下: BCA法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到0.5μg，在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系； Bradford法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到1μg，在 50～1000 µg/mL浓度范围内有良好的线性关系。

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问感觉细胞养一段时间就长得慢了是什么原因呢？

feixue7758527w

这个就跟树木一样，空间有限，细胞爬满了就没有地方，营养也会不足，所以就会生长变慢，所以实验一般都在对数生长期进行实验的。

4 回答318 围观

问求助大佬，已知一个基因，数据库预测其靶向的miRNA，PCR实验，靶基因和miRNA在实验组都是过表达，这个miRNA能继续吗

feixue7758527w

我觉得还是可以继续的，既然都是过表达，说明这个基因还是有特点的，可以进一步研究看看的。后期可以敲低表达看看的。

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问骨髓瘤治疗药物及方案

sswei

1、免疫调节剂：主要用的是来那度胺、泊马度胺、沙利度胺等，能进行免疫相关的细胞调节，同时还有一定的抗血管作用，来抑制骨髓瘤的生长。2、蛋白酶的抑制剂：主要有硼替佐米、卡非佐米、依沙佐米等。3、针对性的单抗药物：现在上市的主要有达雷妥尤单抗、埃罗妥珠单抗，还有组蛋白脱乙酰酶抑制剂，现在临床上批准的这类药是叫帕比司他，另外还有选择性输出蛋白抑制剂

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问细胞培养为何加了双抗仍存在污染

土井挞克树

加双抗只是有一定的预防作用，但不能避免污染现在很多细菌对双抗都有耐药性，所以加了也不一定就能杀死；双抗的保存方式的问题，青霉素在37℃下很快就会分解掉；还有看污染的细菌是不是在抗菌谱中；如果是真菌的话双抗就没有什么用的；

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问做CRP试纸，微球和抗体的偶联比例多少，试纸条喷量多少，能让HOOK效应出现在100mg/L以后？

huarenqiang5

微球和抗体的偶联的比例是1:5。试纸条一般喷量是0.2mg。

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问肌腱，肌肉取材后放多聚甲醛和放液氮有什么区别吗？

feixue7758527w

原则上放多聚甲醛就是固定，把肌肉组织固定在当前时刻，对于细胞形态组织形态都是很好的。放液氮主要就是速冻，对于形态不太好，但是能保存细胞存活，解冻后还是可以培养细胞的。

5 回答641 围观

问求助｜茜素红染色怎样诱导细胞到21天？

skyye

我养的BMSC也碰到过类似情况。这种情况可以提前用多聚赖氨酸或明胶包被孔板，然后再种板。另外换液时尽量轻打在侧壁上，避免直接影响了底部细胞

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问截短质粒做co-ip有没有可能出现所有截短都能够拉到目的分子，如果出现了可能的原因是什么。

dxy_mqg1dtg8

这可能是由于以下原因：1. 共价交联：共价交联是指两个或多个蛋白质之间形成的共价键。如果截短质粒上的区域包括两个或多个蛋白质之间的交联位点，则所有截短都可能与目的分子相互作用。2. 不完全截短：如果截短质粒没有完全截短，也可能导致所有截短都能够拉到目的分子。这可能是由于截短质粒的设计存在问题，例如设计的引物不准确或控制序列没有完全删除。3. 结构域与目的分子的接口：如果截短质粒上的结构域与目的分子

2 回答1162 围观

问请问如何进行内皮细胞糖尿病模型验证？

dxy_mqg1dtg8

以下是一些可能的内皮细胞糖尿病模型验证方法：1. 糖耐量试验（GTT）：该试验需要将小鼠或大鼠分为两组，其中一组被注射胰岛素，另一组不注射。在注射胰岛素后，分别检测两组小鼠或大鼠的血糖水平。如果内皮细胞受到糖尿病的影响，则未注射胰岛素的小鼠或大鼠的血糖水平将会显著高于注射胰岛素的小鼠或大鼠。2. 胰岛素敏感性试验：该试验需要将小鼠或大鼠分为两组，其中一组被注射胰岛素，另一组不注射。在注射胰岛素后，

3 回答248 围观

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