实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问.能不能通过荧光或者激光共聚焦判断目标蛋白在不在细胞膜上？

sswei

可采用毛细管电泳-共聚焦激光诱导荧光技术检测单细胞中目标膜蛋白的检测方法。

3 回答161 围观

问SIM成像时 1、荧光淬灭太快如何减少荧光淬灭，2、活细胞成像时SIM图像背景荧光太高如何调整。3、SIM成像如何调整曝光时间与

huarenqiang5

1.保持避光。2.减少曝光时间减弱光源强度。3.降低样品浓度。

3 回答841 围观

问293t活细胞成像 hoechst染核最适浓度与时间是多少?染核后细胞贴壁不牢换液漂浮怎么办?

huarenqiang5

最合适浓度为 10 ug/ml ，时间建议在5 分钟。

3 回答1926 围观

问DAPI和7AAD有什么区别呢？

huarenqiang5

DAPI检测通道：最好用355nm激发，用440/40BP收集，也可以用405nm激发，450/50BP收集。 7-AAD检测通道：用488nm激发，用670/14BP收集。

3 回答4144 围观

问组织样品可以做这个凋亡实验吗？还是只能用细胞样品？

sswei

组织样品做凋亡实验比细胞样品做比较繁锁。

3 回答201 围观

问Ethidium Homodimer III 染色有什么要注意的吗

dxyc42u

注意事项1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4 回答486 围观

问密度大概多少合适呢？有GFP标签的细胞不能做这个吧？

huarenqiang5

密度在1×105 个/ml至1.6×106 个/ml比较合适。

3 回答422 围观

问想请教小鼠精子检测凋亡精子分群是否能出现分群

huarenqiang5

小鼠精子检测凋亡分群一般都能够出现分群。

3 回答329 围观

问各位老师好，请问看不同温度处理后的精子（冻精）的凋亡率是看早调还是晚凋；还有就是用冻精做流式凋亡检测，样品本身的凋亡率是不是就高

sswei

低温冷冻解冻会使精子细胞发生严重的凋亡。

4 回答370 围观

问各位老师，请问细胞凋亡圈门后占比非常少，大概只有30%左右，这种情况怎么解决呀，还有测完之后细胞分群不是很明显，这是什么原因

huarenqiang5

可能是细胞本身问题或试剂盒或操作方面的问题导致。

3 回答452 围观

问请问如果要跟其他表面marker一起染，染色顺序如何？

huarenqiang5

对于细胞质或者细胞核的 Marker，需要对细胞进行固定破膜/破核膜。在做胞质或胞核 Marker 染色实验操作时，需要先染细胞表面 Marker，再对细胞进行固定破膜，最后对胞内或核内 Marker 染色。此时细胞表面的 Marker 尽量避免使用串联染料，因为「固定」容易对串联荧光素造成影响。

4 回答636 围观

问做了细胞凋亡但是发现早凋和晚凋分不开，是否与实际用量与孵育时间相关

huarenqiang5

早凋和晚凋分不开，与实际用量和孵育时间都有关。

3 回答370 围观

问细胞凋亡检测过程中药物组颗粒数/细胞数达到1/8，颗粒数一万多但图像上细胞非常少，而对照组比值接近1/1，颗粒数同样一万多而图像

sswei

颗粒数过多主要是细胞凋亡后导致凋亡小体过多，需要重新对细胞进行计数。

3 回答131 围观

问细胞主要分布在对角线，可能是什么原因

huarenqiang5

细胞分布在对角线上可能是死细胞，也可能是双阳性细胞，但是这两种细胞的形状是不一样的，死细胞呈现连续的线型分布，而双阳性细胞群呈现圆形的群体分布，可以从对角线上的细胞群体的形状大致判断细胞的性质。圆形的双阳性细胞群和线型的死细胞群有时相互重合在一起，这时依靠散点图无法区分双阳性细胞和死细胞。死细胞的非特异性荧光强度可以与荧光素产生的荧光强度类似，所以不能根据荧光强度的强弱去区分该荧光

4 回答549 围观

问酶活检测

dxy_xextz7w2

可能反应时间不够，可以延长反应时间再进行测定

3 回答575 围观

问为什么不提BCR（B细胞受体）？

sswei

B细胞在分化的大多数阶段表面有免疫球蛋白（SIg）分子，每个正常B细胞在分化的不同阶段或同一阶段上可产生几种不同类型的重链IgM（μ）、IgD（δ）、IgG（γ）、IgA（α），B细胞成熟为浆细胞则失去SIg出现胞浆内免疫球蛋白（CIg），但轻链都为同一型，κ或λ。因此免疫球蛋白中与BCR相关。

3 回答393 围观

问样本怎么进入样本制备间

烧伤科常医生

将样本装到样本转运箱里，经过以下步骤：1. 试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。2. 样本制备区:转运箱的开启,样本的灭活(适用时),核酸提取及其加入至扩增反应管等。3. 扩增和产物分析区:核酸扩增和产物分析。

5 回答422 围观

问plasma membrane proteins是指什么？它位于何处？

feixue7758527w

指的是质膜蛋白，就是跟CD4对应的质膜蛋白安的。

4 回答591 围观

问C57 2周鼠会对乳鼠有影响吗

医闻百里

乳鼠断奶时间约为3周—4周，上一批鼠为两周，是没断奶吗？一笼标准饲养5只成年鼠，乳鼠+新生鼠数量可以加倍。另新生鼠一周内不换垫料，防范新生鼠被自噬的风险。

2 回答635 围观

问大鼠阴道涂片

灵枢天问

感觉没有正常形态，没有尾部那些线状也是卷曲状，不太像

4 回答2018 围观

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