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实验问答

23,059,569 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问贴壁细胞培养，复苏后细胞一直贴不了壁是怎么回事呢？应该在那里找原因？

loveliufudan

下面是一些可能导致细胞无法贴壁的常见原因和建议的解决方法： 1. 培养基成分或质量：检查培养基的成分和配制方法是否正确。确保培养基含有适当的营养物质、补充物和生长因子。也可以尝试更换新的培养基。 2. 细胞密度和状态：检查细胞密度是否适当。如果密度太高或太低，都可能影响细胞的贴壁能力。此外，确保细胞状态良好，没有过度增长或损伤。 3. 培养表面的涂层：贴壁细胞通常需要在培养皿或培养瓶的表面有适当的

5 回答2045 围观

问用贴壁细胞研究核蛋白的互作蛋白，请问提蛋白的裂解液有没有推荐，还有提蛋白的OD值最低多少？

loveliufudan

以下是一些建议： 1. 提蛋白的裂解液：选择适合你研究目的和细胞类型的提蛋白裂解液。常见的选择包括RIPA缓冲液、NP-40缓冲液、Tris-HCl缓冲液等。根据具体实验要求，可以添加蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂、蛋白磷酸酯酶抑制剂等。 2. 提蛋白的OD值：在测定蛋白质浓度时，通常使用光密度（OD）来评估。然而，提蛋白的最低OD值没有固定的标准，因为它取决于所使用的测定方法和设备。一般来说，OD

3 回答259 围观

问细胞培养技术的问题？

loveliufudan

在细胞培养过程中，温度、pH值和二氧化碳浓度是关键的参数，需要进行严格控制。以下是通常用于控制这些参数的方法： 1. 温度控制：细胞培养通常在37°C的恒温培养箱中进行。确保培养箱内的温度稳定，并使用温度计或温度控制器进行监测和调节。保持稳定的温度对细胞生长和代谢活动至关重要。 2. pH值控制：培养基的pH值应保持在适当的范围内，通常在7.2至7.4之间。使用缓冲液来调节培养基的pH值，并使用p

3 回答811 围观

问响应面实验的学习教程有嘛？这个实验难不难呀？相比较正交实验而言建议选哪个做好？

loveliufudan

难度方面，响应面实验相对于正交实验设计可能更具挑战性。响应面实验设计需要更多的样本和试验，同时对于响应曲面的建模和分析也需要较高的统计分析能力。正交实验设计则是一种用于同时考虑多个因素的实验设计方法，通过有限的试验次数来确定因素的主效应和交互作用效应。正交实验设计的优势在于可以通过较少的试验次数获得有效的结果，同时分析和解释较为简单。哪种实验设计更合适取决于研究目标和可用资源。如果你关注特定因素和

5 回答2889 围观

问做盆腔炎大鼠的药效试验解刨时去组织需要取哪些组织好？

loveliufudan

在进行盆腔炎大鼠的药效试验解剖时，以下是一些常见的组织样本可供取用： 1. 子宫：子宫是盆腔炎相关病理变化的重要器官。可以取子宫组织样本进行病理学评估、炎症程度分析和免疫组织化学染色等。 2. 输卵管：输卵管是盆腔感染和炎症的常见部位。取输卵管组织样本可以用于病理学观察、炎症标志物检测等。 3. 卵巢：卵巢是盆腔炎症反应的一部分，可能出现炎症性改变。取卵巢组织样本可以用于病理学分析和炎症程度评估。

3 回答182 围观

问求多个基因变体如何设计引物

小芙fu

最好设计三对引物，一对为同源序列，另两对分别针对特异序列，这样分析出来的结果更丰富。如果有一个Transcript variant不能设计特异的序列，就设计另一个Transcript variant的特异性序列和两个Transcript variant的同源序列即可。我认为，分别测定两具Transcript variant的表达水平比较好，因为两个Transcript variant的干扰效果可能

6 回答1455 围观

问请问结肠癌的免疫组化原理是什么?

dxyc42u

免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应即抗原与抗体特异性结合的原理通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质) 对其进行定位、定性及定量的研究称为免疫组织化学技术

5 回答327 围观

问如果符合秩和检验的条件，秩和检验一定会导致检验效能的下降吗？有没有可以替代的检验方法？

huarenqiang5

用秩和检验，不能充分利用信息，可导致检验效能低。可以此基础上使用Nemenyi 法进行两两比较。

4 回答575 围观

问OA和非OA杂志怎么选，如果经费充足的话？

huarenqiang5

经费允许的情况下建议选非OA杂志比较好。

4 回答571 围观

问独立性检验是不是必须的，还是只要理论上讲得通就行了。比如独立样本T检验或者方差分析，怎么确定独立性？

huarenqiang5

独立性检验是统计学的一种检验方式。与适合性检验同属于X2检验（即卡方检验，英文名：chi square test）它是根据次数资料判断两类因子彼此相关或相互独立的假设检验。假设有两个分类变量X和Y，它们的值域分另为{x1, x2}和{y1, y2}，若要推断的论述为H1：“X与Y有关系”，可以利用独立性检验来考察两个变量是否有关系，并且能较精确地给出这种判断的可靠程度。具体的做法是，由表中的数据算

3 回答658 围观

问审稿的时候如果编辑说样本量未达到最低要求，怎么办？这个时候已经没法补做实验该怎么办？

huarenqiang5

可以进行Logistic回归是没问题的。建模策略采用“先单后多”，也就是先单因素筛选，后多因素PK。

4 回答847 围观

问利用二代CrisPR技术敲除大肠中的基因后，质粒无法消除，怎么办

小芙fu

可以适当提高培养温度来消除其中的质粒

6 回答876 围观

问论文写作中的WB图片怎么样才能做的好看？

huarenqiang5

可以使用office 2016进行编辑，步骤如下:1. 首先将WB的胶片结果扫描成图片格式。当然现在除了胶片法，比较流行的还有荧光二抗的方法直接扫描，这种直接导出图片就可以了。2. 新建一个PPT空白页，将WB图片贴入；3. 双击图片，调出图片处理页面，点击右上角的裁剪工具，将我们需要的条带裁剪出来；4. 点击左上角颜色-->重新着色-->灰度；5. 接下来给图片加一个黑色的边框：点击

4 回答1826 围观

问考马斯亮蓝测蛋白浓度染色液量有要求吗？

huarenqiang5

用老马斯亮蓝测蛋白浓度时其染色液量在100毫升以上就可以了，用1比10的比例即可。

4 回答894 围观

问贴壁法提取小鼠主动脉内皮细胞老是失败，可能是什么原因呢？

是TTT

首先需要保证器械和皿无菌小鼠主动脉内皮组织需要轻柔但是干净地分离，并且多次离心洗干净胰酶消化组织时要注意消化的时间和温度要求提取以后需要立即放入培箱培养，速度很重要

5 回答349 围观

问【求助】为什么没有办法导入readxl包呢？

是TTT

首先确认一下你的readxl包和R是否兼容，需不需要更新把现有resdxl包所有相关文件删除干净，重新下载以后，插入安装命令，有感觉就行了

4 回答481 围观

问RNA提取

是TTT

只有一条单一且亮的条带，其他地方条带模糊，但是也能看出大概位置，所以考虑样品降解了提新样品之前建议重新跑一次琼脂糖凝胶，排除一下跑胶的问题

4 回答662 围观

问各位老师，有养过ishikava细胞的吗，能不能看看你们养的好的状态是什么样的，

是TTT

高倍镜下ishikava细胞形态如下

4 回答218 围观

问求助，克隆形成实验最后发现培养皿外周一圈都没什么颜色，这是为什么呢

是TTT

7 回答397 围观

问刚复苏的癌细胞，这个状态是对的吗

是TTT

这个图片有点不清晰，有高倍镜更好你这个细胞初看就是有一些细胞成团没贴壁，很正常，状态算还行，贴壁细胞复苏第二天如果死的有点多需要赶紧换个液，再观察

6 回答526 围观

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