实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问核蛋白提取后，做Wb。是否也需要BCA定量核蛋白？配平？

土井挞克树

需要的，做wb之前需要进行bca定量核蛋白

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问为什么条带这么散，第四孔道的目的条带可以用去测序吗

dxy_xextz7w2

条带弥散的原因可能是样品有蛋白质或者其他污染，胶有问题或者引物特异性不好，条带很明显的话可以拿去测序

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问养3T3细胞和原代脂肪细胞，有小黑点，看了下好像是黑胶虫，试着重新配了培养液，洗了培养箱，但是培养箱里别人细胞没问题，怎么回事？

土井挞克树

那可能是原代细胞复苏过程中被污染了，重新杀毒杀菌就可以

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问给Balb/c小鼠鼻滴25ulHDM，但都进胃里了，基本没进肺，不知道原因是什么？有同学能分享一下鼻滴的技巧吗？谢谢！

loveliufudan

对于鼻滴技巧，以下是一些建议： • 使用适当的鼻滴管：选择合适尺寸的鼻滴管，使其尖端能够轻松进入小鼠鼻腔，同时避免刺伤。 • 控制滴液速度：缓慢滴入药液，确保液滴能够顺利进入鼻腔而不是迅速进入胃部。 • 鼻腔角度：确保小鼠的鼻腔处于合适的角度，以便药液能够进入。 • 熟练操作：通过反复练习和熟练操作，可以提高鼻滴的成功率。

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问求助🆘怎么用FITC标记细菌？可以在菌悬液里加入一定浓度的FITC，然后在菌的不同生长时期取样观察荧光情况吗？

loveliufudan

是的，您可以使用FITC（荧光异硫氰酸酯）标记细菌。以下是一种常见的方法： 1. 准备FITC溶液：将FITC溶解在适当的溶剂中（例如二甲基亚砜或甲醇）以制备FITC溶液。注意，FITC对光敏感，因此在制备和使用过程中应避光。 2. 处理细菌：收集您感兴趣的细菌样品，可以是培养物或培养基中的细菌。确保细菌处于活跃生长期，并在适当的生长条件下培养。 3. FITC标记：将FITC溶液添加到细菌悬浮液

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问如何测定糖脂代谢？糖脂代谢的途径

loveliufudan

以下是一些常见的测定方法： 1. 血液生化指标：测定血液中的糖脂代谢指标，例如血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯等。这可以通过血液样本的生化分析来完成。 2. 葡萄糖耐量试验（OGTT）：该试验用于评估机体对葡萄糖的处理能力。患者餐前饮用一定量的葡萄糖溶液，然后在特定时间点测定血液中的葡萄糖水平。 3. 胰岛素敏感性测试：通过给予胰岛素刺激并测量血液中的葡萄糖和胰岛素水平来评估胰岛素敏感性。例如，胰岛

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问质粒双酶切怎么做阴性对照？

sswei

酶切反应时加各单酶分别切,两管,用同一种BUFFER,跑胶,看单切的两管是否成线性.如两管均成线性可初步判断双酶切成功. 做转化时,也要进行对照. 设4个:A.即拿双酶切的质粒产物也进行连接反应,这个对照可进一步看双酶切是否成功,如果长出克隆,说明很有可能只进行了单酶切,如没长出克隆,则证明双酶切成功,当然要保证感受态,培基,连接酶都'正常'的情况下.B.酶切过的未进行连接反应的双酶切产物,进行转

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问玻璃毛细管芯片的微流控液滴不稳定

loveliufudan

要改善液滴的稳定性，您可以考虑以下几点： 1. 优化针尖的制备：尽可能使针尖表面更加平滑和均匀，以减少液滴破裂的风险。 2. 考虑使用更适合的表面活性剂：不同的液滴系统可能对不同类型的表面活性剂有不同的需求。尝试不同的表面活性剂，以找到最适合您系统的稳定剂。 3. 优化液滴生成和操作参数：调整液滴的大小、流速和频率等参数，以找到最适合稳定液滴的操作条件。

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问液氮冻融法转化农杆菌，一直转不成功怎么办，菌液pcr无条带

loveliufudan

以下是一些可能的原因和解决方法： 1. 菌液PCR无条带：如果您在进行菌液PCR时没有观察到任何条带，这可能是由于以下原因： • 菌液中没有目标DNA：确保您在菌液中加入了正确的目标DNA。您可以对目标DNA进行质粒提取或PCR扩增，并在转化试验中使用适当浓度的DNA。 • PCR条件不正确：检查您的PCR反应条件，包括引物浓度、扩增温度和循环数等。确保您使用了适当的PCR引物和条件。 • 菌液处

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问sp20细胞有黑胶虫，可以融合吗？融合会有什么问题吗？

凌晨三点Dxy

黑胶虫污染可以影响细胞的生长和存活，因此在进行融合之前，应该先进行细胞鉴定和质量控制，确保细胞没有受到污染。如果细胞已经被黑胶虫污染，那么需要进行消毒处理，例如使用支原体清除剂或其他消毒剂进行处理，以消除污染。如果细胞存在黑胶虫污染，融合可能会受到影响。融合需要将两种不同类型的细胞进行结合，这通常需要使用特定的融合剂进行处理。然而，如果细胞存在黑胶虫污染，这些污染物可能会影响融合的效果。例如，支原

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问栓剂直肠给药如何对实验大鼠进行操作？

sswei

用栓剂给药时，要时刻观察是否有滑出栓剂的问题，以免影响实验结果，可捏紧肛门保持一段时间，也可固定动物头低位状态。

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问流式分选废水中的藻类用什么染色

凌晨三点Dxy

可以用以下方法对污水中的藻类计数：预处理：调节污水的pH至7-7.5，加入少量的表面活性剂，搅拌混合。染色：加入适量的藻类计数染料（如台盼蓝、醋酸铀、荧光染料等），搅拌混合，染色时间根据染料的种类而定。沉淀：将染色后的污水放置一段时间，使藻类沉淀到容器底部。离心：将容器中的污水和藻类一起离心，使藻类沉淀到底部。计数：用显微镜观察离心后的藻类，根据藻类的形态和大小进行计数。需要注意的是，不同的藻类计

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问请问菌液PCR扩增产物多大比较合适（taq酶的）

凌晨三点Dxy

菌液pcr产物扩增的大小并不是固定的，可以根据实际需求进行选择。一般来说，如果需要检测菌液中是否存在某种特定的基因或者片段，可以选择扩增较大的片段，比如几百到几千bp的片段。这样可以更准确地检测出目标基因或片段是否存在，并且可以提供更多的信息。如果只需要检测菌液中是否存在某种细菌或病毒，可以选择扩增较小的片段，比如100bp左右的片段。这样可以更快地得到结果，并且可以减少扩增过程中可能出现的误差。

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问树突细胞鉴定流式细胞术（直接测量）需要买什么抗体

loveliufudan

在树突细胞鉴定的流式细胞术中，用于确定细胞类型的抗体可以包括以下一些： 1. CD11c：这是树突细胞的标志性表面分子，用于确认细胞为树突细胞的关键标记。 2. CD80（B7-1）和CD86（B7-2）：这些共刺激分子在树突细胞表面表达，并与T细胞激活和共刺激过程密切相关。 3. MHC-2（主要组织相容性复合体类II分子）：这些分子在树突细胞中高度表达，用于呈递抗原给CD4+ T细胞。 4.

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问如何设计Fish探针

土井挞克树

fish探针设计方法：1.FISH使用的探针序列来源于基因组或BAC(细菌人工染色体)DNA，包含许多重复序列。串联重复序列(Tandemrepeat)，如存在于着丝粒的α卫星DNA(SatelliteDNA)；散在重复序列(Interspersedrepeat)，如Alu家族。2.探针中的这些重复序列，在与基因组杂交时易产生非特异信号3.人类Cot-1DNAx是在杂交中常用来封闭及去除重复序列的

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问如何确立高效液相色谱法测定有关物质的方法？

凌晨三点Dxy

确立高效液相色谱法测定有关物质的方法需要以下步骤：确定检测目标：确定需要测定的物质，如药品、食品、化妆品等。选择色谱条件：根据目标物质的特点，选择合适的色谱柱、流动相、流速等条件。确定检测波长：选择合适的检测波长，通常选择最大吸收波长或者常用波长。制备标准溶液：制备目标物质的标准溶液，并确定标准曲线。进行样品处理：将样品进行处理，如过滤、萃取、浓缩等。进行色谱分析：将样品注入色谱柱，进行分离分析。

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问求红霉素抗性使用方法

凌晨三点Dxy

红霉素抗性使用方法包括以下步骤：口服或深层肌注，适用于反刍家畜、草食动物等。片剂有0.1g/片、0.25g/片、0.125g/片，每天内服量不同。禽每天用量10mg/kg体重，混饮浓度为0.01%，连用3-5d。注射用乳糖酸红霉素，用量为牛、马、羊、猪1-2mg/kg体重，犬、猫1-5mg/kg体重，成年鸡1ml/10羽，2次/d。使用时需要注意，避免过量使用。

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问细胞污染求助

dxy_bim8kk56

想问问大佬们，怎么看细胞死了，被污染了啊？实验小白😭😭😭

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问测定海参中的钒含量采用哪种方法比较好

土井挞克树

石墨炉原子吸收的方法比较精确，ICP-MS相对精准性差一些

4 回答378 围观

问关于PCR分子检测的内标问题

凌晨三点Dxy

PCR检测是否需要使用内标，以及是否强制使用内标，取决于具体的实验设计和检测目的，以及相关法规和规定。在某些情况下，如临床诊断、疾病监测和防控等，PCR检测结果的准确性和可重复性是非常重要的，使用内标可以帮助校正不同样本之间的扩增效率差异，以及不同批次实验之间的误差。因此，在这种情况下，使用内标是推荐甚至必要的。然而，在其他一些情况下，如科研实验或一些特定类型样品的检测等，PCR检测的结果可能更多

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