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        冻存后的脐带复苏成活率很差

        相关实验:脐血脐带中干细胞分离实验

        user-title

        dxy_l00g4jh0

        液氮中冻存后的脐带,复苏以后成活率很差,想问问大神们,能给讲讲细节么,哪里出了问题

        37℃,2min也融化不了

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        2 个回答

        user-title

        凌晨三点Dxy

        有帮助

        液氮中冻存的脐带细胞,复苏后成活率差的原因可能有以下几点:


        1. 冷冻和解冻过程中损伤:在液氮中冻存时,脐带细胞可能会受到冷冻和解冻过程中的损伤。这种损伤可能导致细胞膜破裂、蛋白质变性等现象,从而影响细胞的活性和功能。


        2. 细胞质量问题:如果脐带血中的造血干细胞本身存在质量问题,如数量不足、活性低下等,那么在冻存过程中可能会受到更大的影响,导致复苏后成活率差。


        3. 复苏方法不当:复苏时使用的离心管、培养基等设备或试剂可能存在污染或质量问题,或者复苏方法不正确,如温度、时间等控制不当,都可能导致细胞受损或死亡。


        4. 存储时间过长:虽然液氮可以长期保存细胞,但如果存储时间过长,可能会导致细胞老化、功能下降等问题,从而影响复苏后的成活率。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能有以下几个常见问题:

        1.融化速度问题

        脐带细胞在-196°C的极低温下很容易受到低温冷冻损伤。融化过程中如果速度过慢,细胞会在一个温度范围停留较长时间,这个温度范围正是对细胞最为危险的。因此通常建议将细胞快速转移至37°C水浴中迅速融化。您提到2min都无法完全融化,说明融化速率过慢,可能是水浴温度没有足够高。

        2.离心洗涤导致细胞损伤

        有些操作流程会在细胞融化后立即离心洗涤,去除细胞冻存保护剂。如果离心力过大或细胞团聚,可能会导致机械性损伤,降低存活率。

        3.复苏培养基不合适

        复苏后的细胞很脆弱,需要一个友善的环境恢复。如果所用培养基的渗透压、pH、营养成分等不合适,细胞很难存活。

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