• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求问6kDa蛋白的转膜条件

        相关实验:蛋白质糖基化的检测实验

        user-title

        糊糊fish

        求问6kDa蛋白的转膜条件

        wx-share
        分享

        4 个回答

        user-title

        dxy_yn5g3wy9

        有帮助

        我之前转过4.5KD

        电泳90Vmaker跑开就停止。

        电转用PVDF膜。0.2A。9分钟

        你这个试试0.2A12分钟

        PVDF膜用甲醇激活


        user-title

        dangaozhanghui

        有帮助

        这个蛋白分子量好小啊

        建议用半干转

          8V 10min

        可以尝试一下

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些常见的转膜条件适用于大约6 kDa的蛋白质:

        1. 膜类型:选择适合的膜类型,如聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide gel)或聚偏二氟乙烯膜(Polyvinylidene fluoride membrane)。这些膜通常用于转膜小分子量的蛋白质。

        2. 转膜缓冲液:使用合适的转膜缓冲液,例如Tris-甘氨酸(Tris-Glycine)缓冲液。缓冲液的pH和离子浓度应根据实验要求进行调整。

        3. 转膜电流:常见的转膜电流密度约为0.8-1.0 mA/cm²。根据蛋白质的大小和所使用的膜类型,转膜时间可能需要进行优化。

        4. 转膜时间:对于6 kDa的蛋白质,常见的转膜时间范围是30-60分钟。转膜时间的选择应在保证蛋白质完全转移到膜上的前提下进行优化。

        user-title

        sswei

        有帮助

        1.小分子蛋白很容易转过,所以摸索适合自己蛋白的转膜条件很重要,这一步很难说一次就成功,所以刚开始的时候可以在接触胶面的PVDF膜上再放一张PVDF膜,转膜结束后,立春红染色,观察使用的条件是否会转过头

        2.小分子蛋白Western转膜液中一定不要加SDS,因为SDS会影响转膜效果

        3.小分子蛋白湿转参考100V恒压,或者150-200恒流,40-60min,都可以跑出来结果,同时也可以保证内参的效果很好

        4.小分子蛋白Western转膜液甲醇浓度为20%

        5.分子量小于10 kDa的多肽或蛋白,建议使用Tricine-SDS-PAGE电泳和转膜系统。



        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序