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        Transwell共培养怎么提取上室细胞的蛋白

        相关实验:贴壁细胞的克隆形成实验

        user-title

        Zaling

        各位大神,我之后需要做两个贴壁细胞的共培养实验,用到transwell,孔径0.4,验证下室细胞的分泌物对上室细胞的影响。

        但是我不太清楚要如何提取上室的细胞蛋白,我看到有用到胰酶消化转移到离心管的,直接在离心管里裂解,后续是如何进行?以及消化后是离心去除胰酶和培养基吗?

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        3 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        就像正常在六孔板里提蛋白一样,因为共培养的小室细胞透不过膜,可以正常按照流程提

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        先用胰酶消化转移到离心管,然后在离心管里裂解,之后用裂解液提蛋白,就和平时提蛋白的流程一样。最后离心去除胰酶和培养基。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        可以先把细胞消化下来,离心去除胰酶,再pbs洗一下,加裂解液,或者不消化直接弃掉培养基,pbs洗后加裂解液。

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