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        HE染色失败,找原因及补救方法

        相关实验:光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验

        user-title

        白白_pz1c

        想做冰冻切片,HE染色做了一批全部失败,下图是肾脏染出来的图,据说是脱水过度导致组织形态改变,请问有什么补救方法吗,我的脱水方式是10%蔗糖组织沉底,15%蔗糖组织沉底,20%蔗糖过夜后OCT包埋直接负80保存。如果没有补救方法那求问肾脏组织应该如何脱水才能确保能看到正常结构呢?此外想了解下心、肝、脾、肺、脑、肌肉、神经、血管的脱水方式是不是各有千秋呢,分别是怎样的呢?求大神解惑~图片描述

        下图是肝脏图片描述

        下图是心脏

        图片描述


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        5 个回答

        user-title

        dxy_5kz0zll2

        有帮助

        低浓度开始多换几次,这样可防止组织脱水过度造成扭曲。如果时间紧凑,可从95%乙醇开始,接着行无水乙醇脱水。通常的方案是从60%~65%乙醇开始,换2次95%乙醇,2次无水乙醇。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        你这情况目前最好的处理办法只能是返工重做了。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        脱水之后是没有办法补救了,再补水效果很差,只能重新做了,不同的组织脱水时间是不一样的。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据您提供的图片,的确存在组织形态改变的现象,可能是脱水过度导致的。为了解决这个问题,可以尝试使用更温和的脱水方法,或者调整脱水时间和脱水液的浓度。具体来说,建议您可以尝试使用以下方法进行脱水:

        以不同浓度的蔗糖溶液进行渐进脱水:可以从5%的蔗糖开始,逐渐升高到10%、15%、20%、25%等浓度的蔗糖。每次脱水时间建议不超过2小时,可以根据组织的大小和类型进行适当调整。渐进脱水可以有效避免过度脱水导致组织形态改变的问题。

        使用乙醇进行渐进脱水:可以从30%的乙醇开始,逐渐升高到50%、70%、95%、100%等浓度的乙醇。每次脱水时间建议不超过2小时,可以根据组织的大小和类型进行适当调整。使用乙醇进行脱水可以更好地保留组织的形态和细胞结构,但可能会对一些细胞器和蛋白质产生影响。

        对于其他组织类型的脱水方式,不同组织类型确实有不同的脱水需求和优化方案。下面是一些常见组织类型的脱水方式:

        心脏:可以使用15%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        肝脏:可以使用10%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        脾脏:可以使用15%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        肺:可以使用10%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        脑:可以使用10%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        肌肉:可以使用15%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        神经:可以使用10%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        血管:可以使用10%蔗糖或者30%乙醇进行渐进脱水,每次脱水时间建议不超过2小时。

        需要注意的是,不同组织类型的脱水方式虽然略有不同,但是总体原则是尽可能避免过度脱水导致组织结构的改变。此外,不同实验室、不同研究目的、不同技术平台之间可能存在细微差别,需要根据具体情况选择最适合的脱水方式。

        user-title

        白白_pz1cuser-title

        感谢~还想请教一下,器官蔗糖脱水需要脱几次才比较合适呢?每次都是提高5%的浓度吗?组织切片之后脱水如何确定脱水时间?脱完之后还需要用什么洗一下再包埋吗?还是说直接取出来擦干就可以OCT包埋了?

        user-title

        sswei

        有帮助

        可采取梯度乙醇补救处理的方法进行补救。

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