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        细胞总是传两代就污染是怎么回事?

        相关实验:消除微生物污染

        user-title

        dxy_8wueoa59

        从公司定制了一个转染的细胞,拿回来之后总是出现第一二代没问题,再传就开始污染,应该是细菌污染,培养基中漂浮着短小的发丝样或者流沙样的东西,细胞状态基本没改变,我们是常规加双抗培养的,也尝试过高浓度双抗低速离心洗或者高浓度双抗培养都没有用。

        因为怀疑是培养基血清的问题,也培养过空培养基、血清,没问题。甚至也换了培养基

        我也养了这个细胞好久了,之前一直没问题,最近一直污染操作也比较谨慎了,都没法避免。

        我也同时复苏了普通细胞和转染细胞,传第三代转染细胞就不行了,普通细胞还没问题,第四代普通细胞也挂了。

        听起来很像我操作的问题,但是我真的真的已经非常谨慎了!

        有没有朋友支支招啊啊啊啊啊!

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        4 个回答

        user-title

        蓝莓小布丁

        有帮助

        实验仪器设备的准备工作和消毒灭菌做好,严控一下微生物的问题

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        污染比较常见的就是细菌污染,是可以看到细菌的。如果看不到细菌,又有很多黑点杂质,碎屑,一个可能是支原体污染,就是你描述的那样一二代还好,第三代就不行了。这个在早期使用抗支药会有效,另一个是没有污染,只是细胞状态不行或者细胞喜欢密集生长但你传代传得太稀。

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        我们实验室之前有人也是这种情况,最后发现是传代密度太低了

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑还是污染,可以往培养基里加入适量抗生素。

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