颗粒细胞

相关实验：小脑颗粒细胞的培养

欣欣SMFQ

2022-07-25

提取小鼠卵巢颗粒细胞的过程体式显微镜找不到细胞怎么办直接剪碎用姨酶消化可以吗

2 个回答

Eason老歌迷

2022-07-27

有帮助

可以直接剪碎用胰酶消化。不过你可以参考一下我们的实验方法，如下:取未成熟的雌性小鼠，先皮下注射pmsg5-10iu，40-48h后注射hcg5-10iu。15-20h后断颈处死小鼠，固定小鼠，75％的酒精消毒后，无菌迅速取下卵巢，置于预热pbs中，于体式显微镜下迅速地去除卵巢周围的包膜及组织等附着物，将剥离后的卵巢转至新的pbs缓冲液中清洗2次。将卵巢转移至混合基础培养基中，37℃温育10-15min。解剖镜下用1ml注射器针头刺破卵泡，释放颗粒细胞和卵母细胞，收集至15ml离心管中。加入i型胶原酶和透明质酸酶混合酶消化3-5min，200目筛网过滤，收集滤液，1000rpm离心5min。用混合培养基重悬细胞沉淀，接种于细胞瓶中，37℃培养24h后更换混合培养基。37℃每培养40-48h更换一次混合培养基即可。