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        提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰, DNA质量一直不高,如何消除多糖的影响?

        相关实验:DNA 降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡

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        丁香粉猪猪

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        3 个回答

        user-title

        迟C迟

        有帮助

        可以买商业化的试剂盒,针对多糖含量高的植物样本的。

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        天一湖医者

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        多糖和DNA的共沉淀物进行再分离。如用TE缓冲液反复清洗共沉淀物,将清洗液合并再用醇沉淀DNA,或将沉淀物溶解后,经琼脂糖电泳,切下DNA部 分再将胶回收,或者用多糖水解酶将多糖降解。

        如果材料较少或要求较高,则可考虑用柱层析方法,使用对 DNA 具有 特异性吸附的树脂来纯化 DNA。曾有文献提到选用 Wizard Purification Kit,PRC-5 柱 ,Sephacryl S-1000 或 S-500,Qiagen Genomic tip 500/G ,或者 CsCl 梯度离心纯化 DNA

        user-title

        未来9

        有帮助

        一般来说,SDS法提取的DNA会还有较多的多糖,使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。

        如果是植物材料本身含糖量比较高,可用以下方法试一试:

        1、 在 DNA 未溶出之前,先用一些缓冲液洗去多糖。如可用缓冲液:100 mmol/LTris -HCl(pH=8.0)、5 mmol/L EDTA和0.35 mol/L Sorbitol洗几次。

        2、 使 DNA 提取液中的多糖先沉淀。在提取液中加入 0.35 倍体积的无水乙醇,迅速混匀,多糖会先沉淀。

        3、 沉淀 DNA 时,使多糖保留在溶液中。

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