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        为什么在保存或抽提DNA过程中,一般采用TE缓冲液?

        相关实验:DNA 降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡

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        小露娜i

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        3 个回答

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        bamboopiggy

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        TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在TE中的稳定性较好,不易被破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液中保存.

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        天一湖医者

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        TE为含EDTA的Tris-HCl(PH 8.0)缓冲液:其中比较关键的成分是EDTA,日常环境中不可避免的存在DNase,而DNase的活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活.镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端.TE中含有的EDTA可以螯合金属离子,从而使DNase失活.而Tris-HCl的作用主要是维持一定碱性PH值,有助于DNA的溶解和稳定.一般长期保存需要TE缓冲液比较好,短期应用的可以使用ddH2O,有助于DNA连接等效果.

        user-title

        未来9

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        在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围,可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉 淀;在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCL(pKa=8.0)的缓冲 系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCL系统,而TE缓冲液中的 EDTA更能稳定DNA的活性.

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