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        如何更温和的吹打消化后的贴壁细胞以提高细胞品质?

        相关实验:冻存细胞的复苏

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        ddpplll

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        5 个回答

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        bamboopiggy

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        主要是控制好胰酶消化时间,别消化不足或过了,对细胞的吹打不宜太多次

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        府宅

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        对于难消化的细胞,如HCT15, LS411和KM12,用不含Ca2+,Mg2+的PBS洗涤一次后,加入稍微多一点胰酶,置37ºC彻底消化(一般为几分钟)至脱落(一晃细胞就掉下来),然后再加培养基终止胰酶反应、离心 (若是无血清培养基,需改加胰酶抑制剂)。这么做的道理是,细胞消化不彻底,势必会增加吹打辅助脱落的次数,而吹打次数越多,细胞活性越差。

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        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        对大部分细胞消化来说,可以在消化到差不多快要脱落的时候,移除大部分胰酶,然后直接加新鲜的培养基将细胞吹打下来,省去离心步骤。残余的胰酶含量很低,所以不会对细胞产生任何影响。

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        丁香清香

        有帮助

        用弯头吸管吹打即可充分冲到培养瓶的各个角落,而且又不容易造成太多气泡从而可以减少对细胞的伤害.

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        未来9

        有帮助

        胰酶要配好,并且加上EDTA,胰酶质量要好,这样对细胞的损伤较少,另外消化得也好

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