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        通过染色进行的细胞分选一直不太成功 请问注意事项?

        相关实验:活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

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        ddppll

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        4 个回答

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        Kimser

        有帮助

        样品应保存在最适合它们的富营养培养基中。一般建议血清浓度尽量高一些,因为在分选过程中,血清浓度会被收集到管中的鞘液稀释。收集管尽量保持在最佳温度,并含有用于保存细胞活力的培养基。在分选完成后尽快处理分选后的细胞有助于保持细胞活力。

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        小布丁瑶瑶

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        血膜上有染料颗粒沉积,可用甲醇溶解,但需立即用水冲掉甲醇,以免脱色。染色过谈,可以复染,复架时应先加缓冲液,创造良好染色环境,而后加染液,或加染液与缓冲液的混合液,不可先加染液。

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        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        建议分选上样管中的缓冲液使用含2% FBS 的 PBS ,普通培养基中的酚红可能会干扰分选;若用培养基的话,颜色不能太深,血清浓度不能超过2%,否则粘性太大影响分选。

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        dxywode

        有帮助
        1. 安全性问题:由于在分选过程中,样本可能通过液滴震荡产生气溶胶,所以不接受会传播人类病原菌的生物有害样本,也不接受含放射性生物样品。
        2. 应知道细胞的大小与形态,以便选择分选用喷嘴。所分选细胞的直径最好小于喷嘴直径的1/5,至少小于1/3。细胞的形态也会影响了分选的结果,理论上越接近于球形的细胞,分选过程中的剪切力对细胞造成的伤害就越小。形态特殊的细胞应选择较大的喷嘴,以减轻分选过程对细胞造成的伤害。
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