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科研学霸天团，48小时有问必答

问乳腺癌干细胞和乳腺癌干性是一回事儿吗

dxyc42u

这不是一回事，后者只是代表有干细胞部分特性的细胞

3 回答670 围观

问细胞间隙有小点，请问是污染吗？

橙汁儿青柠味

大一点的应该一些细胞碎片，可能是因为细胞消化吹打过度导致的

4 回答512 围观

问划痕如何才能做到笔直且美观？

橙汁儿青柠味

拿着直尺卡在培养板上方，然后用移液枪插一个10ul的枪头，沿着直尺在孔板中划线

3 回答463 围观

问培养悬浮CHO-K1细胞培养过程当中，使用相同培养基、相同的培养方式，部分细胞存在大量结团？

loveliufudan

在培养悬浮CHO-K1细胞的过程中，如果使用相同的培养基和培养方式，但存在部分细胞形成大量结团，可能是以下几个原因：细胞因子和营养物质不均匀分布：在悬浮细胞培养过程中，细胞因子和营养物质的分布往往不是非常均匀的，可能会导致部分细胞生长快，形成结团，而其他细胞生长缓慢。细胞密度过高：如果在培养基中存在过多的细胞，细胞之间的接触会增加，导致部分细胞聚集形成结团。培养条件不适宜：在悬浮细胞培养中，温度、

3 回答465 围观

问细胞培养出现的未知小黑点究竟是什么，根本不像黑胶虫？

橙汁儿青柠味

有可能是支原体污染了，可以采用支原体去除剂

4 回答374 围观

问原代细胞分离，例如肠肠皮细胞，分离时间较久，怎么能保证细胞的活力？

橙汁儿青柠味

在冰浴的pbs中分离原代细胞，可以提高细胞存活率

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问细胞培养时由于没有原来使用的培养基如dmem，于是换成例如1640培养基，经常调换培养基会影响细胞吗？

橙汁儿青柠味

更换培养基容易影响细胞状态，每个培养基的成分不太一样，所以每个细胞的最适培养基不一样

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问如何对细胞进行准确计数？比如如何证明离心管中只有单个细胞？

Dr_劉医生

可以使用显微镜观察。将细胞悬液放在显微镜下，如果只有一个细胞，则可以看到一个单独的细胞。另一种方法是使用流式细胞术，该方法可以快速准确地计数大量细胞。流式细胞术使用荧光染料标记细胞，并通过流式细胞仪进行计数。

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问贴壁细胞传代时，用到胰酶消化时，有少量胰酶存在是否会影响细胞状态？

橙汁儿青柠味

存在少量胰酶不影响细胞的，因为加入的培养基能够中和掉胰酶的作用

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问贴壁的哺乳动物细胞的转染实验完整做法

sswei

贴壁细胞的转染:在准备做细胞转染的前一天把细胞铺进细胞培养皿中，加入完全培养基培养24小时，使得细胞汇合度达到百分之六十到百分之八十。在转染前需要把完全培养基换成无双抗的完全培养基，以排除双抗对转染效率的影响。根据转染的细胞数不同选取适量的纯培养基分别稀释质粒和lipo3000，其中稀释完的质粒中加入p3000充分混匀后再加入稀释过的lipo3000中，把混合液轻柔的吹打混匀，室温孵育20分钟。孵

4 回答1282 围观

问胰酶消化细胞时间怎么判断从而避免过久或不足？

橙汁儿青柠味

胰酶消化的时间以细胞变圆、轻拍细胞侧壁脱落为佳

4 回答1650 围观

问3T3-l1细胞诱导分化以后进行油红O染色，着色太深，有的地方黑乎乎的一片怎么解决？

橙汁儿青柠味

可以用pbs多洗涤几遍，另外应注意细胞密度

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问3t3-l1细胞进行诱导分化时密度在80%可不可以？为啥诱导分化时间越长，细胞之间的间隔会越变越大？

loveliufudan

密度在80%时，3T3-I1细胞可以进行诱导分化，但需要注意的是，细胞密度过高可能会导致细胞自身的压力过大，影响诱导分化的效果。因此，在进行诱导分化前，应该考虑到细胞密度的因素，控制好细胞的数量，以达到最佳的诱导分化效果。关于诱导分化时间越长，细胞之间的间隔会越变越大的问题，这可能是由于细胞分化后的功能和形态发生了改变，导致其对外界环境和邻近细胞的作用方式和联系发生了改变。例如，分化后的细胞可能会

3 回答391 围观

问H520鳞癌细胞株做小鼠成瘤实验反复失败，其他细胞株都可以，大家有没有遇到过？

loveliufudan

如果其他细胞株都可以的话，那么你就要考虑是否使用与H520鳞癌细胞株兼容的小鼠品系，是否存在免疫排异反应？

3 回答235 围观

问验证某目的基因在肺腺癌细胞株中的表达，细胞株怎么选

汤姆卜丽波

你可以先在网站上用生信数据筛一下，选择有差异表达的细胞株来培养

3 回答404 围观

问做的3T3-l1细胞，复苏第八代，结果培养皿里面很多飘起，并且空泡化严重，请教大家是怎么回事？

橙汁儿青柠味

细胞内出现空泡多半是因为细胞老化或者消化过度导致

4 回答399 围观

问B16F10细胞培养问题？

汤姆卜丽波

你可以多加血清养一段时间，就是细胞状态不行了

3 回答398 围观

问Gpower样本量计算求助

土井挞克树

Gpower样本量计算步骤如下：1、选择统计方法：（Exact—Fisher\F test—方差分析\t test差异性t检验\X2test—卡方检验\Z test—非参数检验）2.进一步选择分类：（这里以t 检验为例）3、确定想得到的参数：①A Priori：研究设计时，想知道所需样本量N②Compromise：α与β固定（不常用）③Criterion：计算α（一般α为0.01、0.05不需要计

2 回答3777 围观

问亚组分析找不到异质性来源

土井挞克树

建议用年龄作为分组，只要异质性差异不大就可以做，其他的分组都不太合适

2 回答868 围观

问有没有战友做无细胞蛋白表达系统啊

loveliufudan

首先，确保您的质粒构建是正确的，包括检查您的DNA序列和构建方法是否正确。此外，您需要选择适合您的蛋白质的无细胞表达系统和载体，不同的蛋白质可能需要不同的系统和载体。其次，确保您的转化和诱导条件是正确的。对于BL21 (DE3)菌株，常用的是IPTG诱导，但是有时过高或过低的IPTG浓度都会影响蛋白质表达。此外，您需要在合适的时间点收获细胞，不同的蛋白质可能需要不同的时间点。最后，确保您的提取条件

2 回答481 围观

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