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科研学霸天团，48小时有问必答

问梅雨季节，怎么防止支原体污染？

loveliufudan

以下是一些防止支原体污染的常用方法： 1. 严格的无菌操作：在实验室中进行严格的无菌操作，包括使用无菌技术和消毒实验台、操作器具和培养皿。确保培养物和培养液都不受外界环境的污染。 2. 经常更换培养基：定期更换培养基可以减少细菌和支原体的增殖。培养基中添加适量的抗生素，如青霉素和链霉素，可以预防细菌和支原体的污染。 3. 定期检测和筛查：使用特定的检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）或荧光染色等，

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问贴壁细胞爬片问题，同一批细胞，同时爬片，一共爬了6个孔，三个孔贴壁了，三个孔一点都没有贴壁，如下图所示，这是什么原因呢？

dxyc42u

如果不贴壁了，可以考虑包被下。

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问胰酶消化或者pbs洗涤会影响DC2.4细胞成熟吗？

dxy_xextz7w2

胰酶消化一般不会影响细胞成熟，但是注意消化时间不要过长，pbs洗涤也不会影响，它只起到期“清洁”和缓冲的作用

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问原代嗅鞘细胞可不可以传代，传代了会怎样

dxyc42u

可以传代，但是只能传几代没法传多了

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问判断细胞死活，并计数死活细胞数量最恰当的方法

mistll8

一般用细胞技术法精确一点的话用流式

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问美天旎磁珠分选盒 CD45R、CD19阳选，和CD43 (Ly-48)阴选盒子所得细胞群来源差异大吗

土井挞克树

差不太多，得到的都是双阳B的分选细胞

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问脂肪细胞油红O染色，为啥油红O试剂盒和配置的油红O粉末染的细胞颜色不一样呢？油红O粉末应该怎么配呀～

行而上学不行

油红O1g，异丙醇100ml，使用时以油红o饱和液一份加蒸馏水两份，过滤后使用

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问鼠来源的神经干细胞该如何提取原代细胞及培养好呢？

loveliufudan

具体步骤：新生鼠使用眼科剪将动物断头，并用镊子剥除头部的皮肤。在冰D-PBS液中沿颅骨人字缝从后向前剥离。一般左手持弯镊，在动物两眼处以适当力度固定；右手持直镊，完成剥除皮肤、骨骼以及分离组织等工作。在显微镜下利用精细器械分离皮层或海马时，沿皮层边缘以45°角小心划开，并逐步使之剥离，转移组织入盛有冰D-PBS液的35mm小皿中；然后用精细器械仔细去除每个皮层或海马的脑膜（整个过程需要在低温冰袋上

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问关于BMDC流式鉴别

loveliufudan

你提到的实验方案基本上是可行的，可以用于鉴定骨髓来源的树突细胞。你选择了一系列抗体来标记树突细胞的特定表面标志物，这可以帮助你识别和分析这些细胞。你选择的抗体组合如下： 1. APC/Cyanine7 anti-mouse CD11c抗体 - 用于标记CD11c表面标志物，这是树突细胞的常见标记物。 2. APC/Cyanine7 Armenian Hamster IgG同型对照抗体 - 用于作为

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问神经元缺氧缺糖模型怎么判断造模成功

loveliufudan

在神经元缺氧缺糖模型中，判断造模成功可以根据以下几个方面进行评估：1. 细胞形态变化：缺氧缺糖条件下，神经元通常会发生形态上的变化，如细胞体肿胀、轮廓不清、突起消失等。通过显微镜观察和比较缺氧缺糖组与对照组的细胞形态变化，可以初步评估造模成功程度。2. 细胞存活率：缺氧缺糖条件会导致细胞死亡，因此可以通过细胞存活率来评估模型的成功程度。常用的方法包括细胞计数、细胞存活染色剂（如Trypan blu

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问RAW264.7细胞培养出现大细胞是什么原因呢？

sswei

可能由于细胞刚刚复苏，不很适应，比较脆弱，而造成细胞突变，建议加大血清，继续培养观察一段时间。

4 回答528 围观

问这个n=10是什么意思？

dxy_w0bqu5c9

n=10是指每一组的数量有10只

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问Transwell实验下室可见大量细胞穿出但是染色却看不到明显的细胞的原因

晓雨知春来

有可能是小室的膜孔径大于细胞直径，导致细胞漏下去了。

3 回答1439 围观

问请问怎么找到我这个基因家族在所有绿色植物，比如低等植物到高等植物中全部的基因呀

sswei

可通过phytozome（JGI）数据库进行查找。

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问耐药细胞株药物刺激的时候，细胞长得很快。但是刺激时间都没一半，这个时候可能传代吗？

feixue7758527w

最好不要传代，这样做，会容易影响实验结果的，而且传代细胞不稳定，也容易影响结果。建议下次种板子，种的细胞少一点的。

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问核蛋白提取后，做Wb。是否也需要BCA定量核蛋白？配平？

土井挞克树

需要的，做wb之前需要进行bca定量核蛋白

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问细胞过多会导致细胞死亡吗？

小芙fu

细胞密度过大可能会导致细胞死亡

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问养3T3细胞和原代脂肪细胞，有小黑点，看了下好像是黑胶虫，试着重新配了培养液，洗了培养箱，但是培养箱里别人细胞没问题，怎么回事？

土井挞克树

那可能是原代细胞复苏过程中被污染了，重新杀毒杀菌就可以

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问0.1M，pH为7.4的PBS的配方？

loveliufudan

PBS（磷酸盐缓冲盐水）的常用配方是以0.1 M浓度的磷酸盐和0.15 M浓度的氯化钠制备，pH值调整至7.4。下面是一种常见的PBS配方： 1. 准备0.1 M磷酸盐缓冲液（pH 7.4）： • Na2HPO4 (二硫酸钠) 7.21 g • NaH2PO4·H2O (磷酸氢二钠) 1.15 g将上述两种化合物分别溶解在适量的去离子水中，然后混合调整至pH 7.4。请注意，调整pH时可以使用稀盐

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问各位大佬，我想问一下这是什么菌污染，养的是海马原代细胞

李金星星儿

看着还不错，细胞生长挺均匀的。上面有一点点其他东西，应该不影响。

4 回答301 围观

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