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        液体 怎么进行显微镜制片 两次染色怎么操作

        相关实验:显微镜技术

        user-title

        dxy_ucbt3299

        目前实验室有纯藻液和放在废水里的藻液需要进行显微镜制片,还需要另外用SYTO green I 和PI进行分别染色,怎么操作合适呢

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        2 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        将待测藻液通过稀释或离心浓缩,调整OD值至0.15左右,与终浓度为0.05μg/ml-1μg/ml的BODIPY荧光染料和终浓度为0%-40%的DMSO混合后,在25℃-60℃温度范围内,避光染色10min,选择400-600nm作为激发波长,测定在发射波长450-700nm之间的荧光强度,荧光强度与藻细胞中油脂含量呈正相关,可用于进行相对或绝对定量

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        对于纯藻液和放在废水中的藻液的显微镜制片和荧光染色,以下是一种操作合适的方法:

        1. 准备显微镜载玻片:在干净的显微镜载玻片上滴加适量的藻液。可以使用移液器或者微量吸管进行滴加。

        2. 干燥载玻片:将滴加的藻液载玻片置于洁净环境中(例如无尘培养箱或洁净工作台),使其在室温下自然干燥。避免直接暴露于阳光下,以防止藻液中的细胞失去活性。

        3. 荧光染色:

        a. 准备SYTO Green I和PI染色溶液。根据染色试剂的说明书,将合适浓度的染色溶液配制好。

        b. 在干燥的载玻片上滴加适量的SYTO Green I染色溶液,覆盖整个载玻片表面,避免气泡的产生。孵育一段适当的时间,以让荧光染料与藻细胞结合。

        c. 小心地从载玻片上除去多余的染色液,可以用纸巾轻轻吸去多余液体,避免过度干燥。

        d. 在干燥的载玻片上滴加适量的PI染色溶液,覆盖整个载玻片表面,避免气泡的产生。孵育一段适当的时间,以让PI染料与藻细胞结合。

        4. 观察显微镜制片:将准备好的显微镜载玻片放入荧光显微镜中进行观察。根据荧光染料的特性,选择适当的滤光片和激发波长来观察和拍摄荧光信号。


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