实验问答22,769,109 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问分选出来的肿瘤干细胞表面标志物阳性要达到多少，才能进行下一步实验。我是双阳性选用CD133和CD44

秋秋欣欣

一般至少是要达到60-70左右

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问制作划痕实验细胞密度可以是多少为合适？

bamboopiggy

大概80-90%的细胞融合度，然后划痕后，记得换液

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问怎样可以让人源性星状细胞LX-2细胞能长快一点？加用细胞因子TGF-β刺激会有效果吗？或者加大培基的FBS总量？

bamboopiggy

用进口血清，如果长的太慢，可以考虑提高血清浓度到20%

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问RNA的提取时260\230

bamboopiggy

可能你提取的rna的浓度低，导致260/230比值的差异小，从而值不好

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问请问想做三个细胞共培养要如何选择培养条件？

府宅

如果有文献参考的话就比较容易开展实验，然后根据实际情况稍作调整，比如共培养的比例、共培养的时间、检测的时间等；如果没有任何参考，就自己多设置几个预实验条件进行摸索，确定个大致的条件。

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问有没有用过磁珠分选大鼠脑原代细胞

天一湖医者

磁珠分选大鼠脑原代细胞的初步研究。

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问星形孢菌素诱导293T细胞凋亡后检测

汤姆卜丽波

转膜时间不要太长，选择0.22um的膜用来转膜，需要注意蛋白是否转过等，可以通过marker预染，保证滤纸上不要有蛋白。如果你的是湿转的话，100v转的话时间可以低点，1h到1.5h看看。一抗4度过夜就行了不要孵育太久，不然背景会加深的。看看说明书的抗体推荐稀释度。

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问星形孢菌素诱导293T细胞凋亡

秋秋欣欣

一般浓度为10-200nM，你可以做个梯度。时间1-3天都是可以的，看细胞代谢周期

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问难道这才是隐窝？

秋秋欣欣

你这看着不太像隐窝结构哦，隐窝结构有点像星状的

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问高分化pc12

秋秋欣欣

是可以的,但是更常用的是pc12未分化细胞

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问关于PBMC培养的问题求助

秋秋欣欣

可以先收集未贴壁的细胞，再消化收集贴壁细胞，细胞损耗大的话，注意控制好消化时间

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问在进行乳腺细胞氨基酸的添加前，怎么保证细胞可获得维持生长及合成酪蛋白的氨基酸？

秋秋欣欣

0.5%加入，然后调ph，灭菌

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问求助：如何利用检测细胞中某些特异性蛋白的表达情况来鉴定细胞？

灵枢天问

你是想通过检测蛋白鉴定细胞么，那也可以直接鉴定细胞，同功酶分析、染色体组分型、人淋巴细胞抗原 (HLA) 分型和扩增片段长度多态性 (AFLP) 的特征分析、STR 分析都可以用来鉴定，STR 鉴定的试验流程:细胞 DNA 提取——多色荧光体系复合扩增——DNA 片段分离荧光信号检测——数据分析得到的基因分析和图谱——与数据库对比和结果分析——出具数据报告，一般交公司会快一点

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问细胞迁移侵袭实验求助

bamboopiggy

侵袭和迁移的细胞一般铺的多少就不一样，这两者之间没有可比性。只要你的实验组和对照组有差别就可以。

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问sp2/0状态

灵枢天问

有点可能是自发转化了，培养环境再稳定一些，我看你的细胞状态挺好的，很快就会好了

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问细胞给药

dongshenmedonga

建议再筛一次浓度，确定有效作用区间。

4 回答1279 围观

问求助其他肝癌细胞系

秋秋欣欣

有 LO2还有SMCC7721 huh7

3 回答240 围观

问求助，成纤维细胞敲除常用的Cre酶有哪些。

秋秋欣欣

Cre重组酶，beta内酰胺酶

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问circBank数据库问题求助！

灵枢天问

如果你筛出来的circ不多的话也可以直接实验验证

3 回答144 围观

问组织DNA提取用到哪些试剂,其主要作用是什么?

balalaLy

比如蛋白酶k，消化组织或细胞的蛋白，加快释放DNA分子

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