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问
冻存细胞为啥要在4摄氏度保存30分钟
天一湖医者
细胞冻存的细胞冻存方法大致上是相同的,理想的是采取梯度降温,可根据自己的具体条件加以调整。4度及-20度放置时间不可过长,对于-20度来说,30分钟和更长时间没有区别。-20℃时间过长,会形成过大冰晶,造成细胞大量死亡。
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问
细胞传代最多可以传多少代?
府宅
一个人的一个细胞分裂次数有限,大约50到60次左右在动物细胞体外培养过程中细胞在培养到40-50代时,细胞的分裂速度会明显减缓,甚至完全停止。
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问
细胞为什么会出现老化现象
dxy_gwrp7ndq
1. 不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降,产生细胞接触性抑制。2. 细胞不要消化过度。采用胰蛋白酶消化细胞,会造成细胞表面一定程度的细胞损伤。3. 最重要的是使用优质的血清和培养基
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问
建立基因调控网络时的小问题
dxy_btpk2zd7
建议还是先看看GEO和基因表达的科普文章。GEO里的就是基因表达数据,有原始数据,有预处理过的。一般你最后拿到的应该是一个矩阵,行代表基因(通常会有2到5万),列是样本。你就从这个矩阵里挑基因出来,学习BN即可。当然,如何挑基因还是个很tricky的问题,也有很多方法。 关于重构基因调控网络,方法已经有很多。选取何种方法,关键取决于你想通过网络得到何种信息。BN十多年前就已经有所应用,听起来很fa
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问
如何选择聚乙二醇(6000)的浓度来沉淀DNA?
天一湖医者
采用 NaCl盐析法,将线粒体大分子RNA与线粒体DNA分开,得到线粒体DNA 粗制品.再用聚乙二醇6000沉淀法进行纯化,从而得到纯的线粒体DNA.
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问
原代细胞怎么扩增并保留足够数量以供试验需要?
balalaLy
复苏后要先确保保种,先继续传代到第5代左右才开始开展实验
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问
转投期刊咨询
府宅
期刊审稿偏慢,要4-8周,录取较难
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问
求助:AHRQ横断面研究质量评价条目解读
天一湖医者
Meta分析系列之四:观察性研究的质量评价工具》中找到了翻译的版本:1是否明确了资料的来源(调查,文献回顾)2是否列出了暴露组和非暴露组(病例和对照)的纳入及排除标准或参考以往的出版物?3是否给出了鉴别患者的时间阶段?4如果不是人群来源的话,研究对象是否连续?5评价者的主观因素是否掩盖了研究对象其他方面情况?6描述了任何为保证质量而进行的评估(如对主要结局指标的检测/再检测)7解释了排除分析的任何
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问
内质网应激 功能实验
天一湖医者
可以采用原代小鼠肠上皮单层培养系统同时采用衣霉素(tunicamycin,Tm)处理进行scRNA-seq(衣霉素可以通过抑制蛋白质N-糖基化来诱导内质网应激)实验。
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问
基因频率如何计算
汤姆卜丽波
A频率x,X²×3577=1382x=62.1%则a频率=37.9%
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问
求助流式测细胞周期,s期成为一个小小钝峰,好像没有g2期
天一湖医者
没有G2期,我个人认为是药物对细胞周期产生了阻滞
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问
求助:怎么向细胞培养体系中补充额外的氨基酸作为培养基础?
bamboopiggy
直接加入培养基,100ml加0.5ml就好
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问
单抗制备,细胞融合。求助
biggermystery
想问问您融合细胞有铺饲养细胞吗,然后最后您铺的融合细胞密度是多少呢?
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问
养细胞求助
dxy_gwrp7ndq
很可能是黑胶虫,这也没什么特别好的方法。
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问
细胞传代离心不下来
bamboopiggy
不是离心机的问题,感觉是你们细胞消化过了的样子,要不你镜下看看消化程度,然后收细胞。
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问
EL4小鼠淋巴瘤细胞培养
汤姆卜丽波
它是个悬浮细胞,所以要注意离心沉降,10%血清,一传二传代。
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求大神帮助
汤姆卜丽波
看起来反而像是平板污染了一样,菌类生长密度大的在圈周围,我觉得不算
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Raw诱导破骨细胞不成功
天一湖医者
你可以试试更换RANKL,换成RD的。
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问
请教一下hasmc和havsmc的区别
天一湖医者
人主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。人主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发
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问
使用鸡毒支原体作为病原菌,细胞细菌污染。
bamboopiggy
你用支原体清除剂,或者是:阿奇霉素、强力霉素,或有时左氧氟沙星或莫西沙星,试试,青链霉素对没有细胞壁的细菌没有作用的
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