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【求助】想问大家细胞实验中叶酸建议用什么溶解呢
秋秋欣欣
叶酸较易溶于乙醇,酚吡啶,氢氧化碱和碳酸碱溶液。然后再调ph
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【求助】组化染色做n=3还是n=6?
bamboopiggy
每组至少三只,如果5只或7只会更好
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问
有做过CIA模型的大佬吗
Eason老歌迷
可能是和感染有关,要注意打针前消毒。同时建议1免得时候打在尾根部,2免打在小鼠尾根部靠上一点的地方(可以理解为屁股)。
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问
请教一下各位质粒小提的注意事项
balalaLy
最终洗脱的时候可以把洗脱液加热到50度左右,可以明显提高质粒洗脱效率
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问
求助大家,帮忙看看这个细胞咋回事?
bamboopiggy
感觉就是细胞污染了,你看看培养基是不是变黄了。
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问
请问收集细胞提取RNA时,怎么确定收集的量能够提取获得足够的RNA?
bamboopiggy
一般一个六厘米皿或六孔板的一个孔就够了。undefined10^5个细胞绝对够
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问
质粒浓度低
bamboopiggy
你这50ml不会是在50ml管里,封死管口直接摇的吧?感觉是你菌量不够
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问
qpcr求助
bamboopiggy
你rna的质量如何?大批量提取,rna质量会出现偏差,然后影响qpcr结果
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问
BMDC与OT-I 细胞共培养
Eason老歌迷
遇到过类似的情况,但是具体的药物不同,也是实际情况和预计情况有很大差别,这种情况建议你重新在做两次重复,看看是什么情况。
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4T1细胞出现凋亡残留的碎片,细胞变小,什么原因
天一湖医者
细胞状态好的时候生长特别旺盛,代谢很快,所以养这个细胞需要勤快,基本上每天都需要操作,一般是一天换液,第二天传代,在50%以上就可以传代了,1传3-4都可以,稍微长的太满达到80%以上,接下来传代后的状态就有影响。这个细胞很容易出现培养瓶边缘角落消化不完全出现累计的现象,这一部分出现凋亡会影响到整个培养瓶的细胞状态。
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犊牛小肠上皮细胞提取后不贴壁,但是感觉培养瓶中细胞增多,怎么办
天一湖医者
细胞不贴壁的一些原因 1. 胰酶消化时间把控不当:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。 2. 缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。 3. 支原体或细菌的污染。 4. 培养液配制、储存不当,如pH值过碱,Gln量太少等原因。
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犊牛小肠上皮细胞提取不贴壁的问题
天一湖医者
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流式测细胞钙离子的问题
Eason老歌迷
流式细胞仪测定钙离子变化有一定的问题,例如在测定过程中可能会造成细胞的激活,而钙离子又是很容易激活的。另外测定的值是平均值。如果有条件,建议用confocal。
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A549细胞培养问题
天一湖医者
细胞出现空泡的原因很多,可以归结为细胞老化和衣原体感染两个主要原因。1.细胞老化。 原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况,是有些细胞处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。传代细胞出现这种状况比较少见,可能的原因是细胞代龄较长,老化严重。2.衣原体感染。 一旦一些细胞出现空泡化,继续培养,空泡范围会扩大,即使传代后也如此,出现这种情况,细胞基本无法挽救。后来检测发现,此种细胞存在
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急!!大鼠脑缺血再灌注Evans blue染色
Eason老歌迷
以前师兄做的时候,他是从颈静脉注射,几秒后钳夹心脏出来的大血管,迫使染料进入冠脉不出来,然后取标本,据说效果很好,还有人从颈动脉注射,也是钳夹主动脉迫使染料留在冠脉,你可以试试,或者调整一下方案
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新手小白在线求助!!!
Eason老歌迷
1慢病毒。例如人类免疫缺陷病毒(HIV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、马传染性贫血(EIA)、猫免疫缺陷病毒(FIV)都是慢病毒属,慢病毒属的原文是Lentivirus,其中Lenti-在拉丁文中有慢的意思。你如果想了解具体的慢病毒信息,你可以去购买的官网查一下,基本都有。2我简单介绍一下最经典的慢病毒吧,HIV-1病毒基因组是由两条正链的RNA组成,长度约为9Kb左右,两端是长末端重复序列(LTR
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Zdock出现问题
Eason老歌迷
你先看下你的ZDOCK文件有没有可执行权限,如果有还执行不了,那你的zdock程序肯定不在你执行目录下,如果你不会调这个路径,可把zdock程序放到/usr/bin/目录下,然后执行的时候直接ZDOCK就好。
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求助养LMH细胞细节
天一湖医者
细胞状态变差主要是由于两种原因:1 细胞营养条件不够2 细胞被污染了
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akk培养问题。。。。求助求助求助
天一湖医者
液体培养基变浑浊的原因有以下几点:细胞受到损伤,细胞内容物外露造成的。培养基可能污染了,取部分培养基进行检菌试验
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实验设计
Eason老歌迷
你既然要看这两个蛋白表达对它的影响,你可以先跑wb看看正常表达情况,然后做设计引物,构建质粒,转染然后做pcr,可以分几组,一组空转,一组敲低,一组过表达,然后慢病毒转入细胞,然后做细胞实验看看细胞侵袭和迁移能力变化,然后做wb看看这几个细胞里的蛋白表达情况,这些差不多够你开了。
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