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细胞培养基浑浊 想请教一下是什么污染?以前没有见过
whilt-shirt
有可能是真菌污染,建议细胞间、培养箱重新灭菌后再开展实验
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问
MA104细胞感染病毒
Eason老歌迷
具体可以参看这个文献,”轮状病毒感染诱导MA104细胞感染相关蛋白的分析鉴定”。感觉是你细胞生长状态不好,都老化死亡了。
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问
关于CD11b和Iba1标记活化的小胶质细胞
Eason老歌迷
cd11b和iba1组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11b。
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问
如何去除变性脂肪导致的荧光背景呀?
天一湖医者
向活细胞成像样品中添加几滴背景抑制剂,可以去除变性脂肪导致的荧光背景。
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问
内质网荧光染色证明内质网应激
Eason老歌迷
具体可以参看这篇文献,讲的很清楚,”内质网特异染色法在内质网应激评价中的作用”
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问
求线粒体自噬特异性抑制剂
Eason老歌迷
我们一般用3MA比较多,推荐你用这个。现在有文献已证明ULK复合物和Beclin1的正调节剂的抑制剂可阻断线粒体自噬,包括MAP激酶,JNK1,ERK和p38的抑制剂。阻断线粒体自噬也有其他方式,如class III PI3激酶抑制剂可通过抑制自噬捕获阻断自噬进程,所以说这些也可以用。
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问
关于stat3的抑制剂sh-4-54的使用情况
Eason老歌迷
好的。SH-4-54是一种高效的STAT抑制剂,其作用STAT3和STAT5的KD分别为300 nM和464 nM。用于体外研究 的话,SH-4-54在人恶性胶质瘤脑肿瘤肝细胞(BTSCs)中表现出空前的细胞毒性,而在人类胚胎星形胶质细胞中没有毒性。此外,SH-4-54有效抑制STAT3磷酸化和其下游转录靶点。用于体内研究的话, BT73原位异种移植的小鼠体内,SH-4-54 (10 毫克/千克,
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问
干细胞原代培养能不能用南美的血清
bamboopiggy
你可以先买一瓶试试,如果好,就直接把这一批买了吧,干细胞对血清比较挑,南美血清和澳洲血清一般也就是在有效的蛋白成分和抗生素含量上有区别,但是还不至于澳洲用5%,南美 用10%的这种差别,该用多少就用多少就好。
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问
BV2细胞污染问题
Eason老歌迷
你换液继续培养后就观察到细胞间较干净。然后又复苏了较早的细胞,依然观察到污染问题,那就说明还是你之前冻存的细胞问题。
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问
问p-gp逆转耐药实验阳性对照药为什么都选维拉帕米?
Eason老歌迷
因为最开始发现的第一代p—gp抑制剂就是它啊,第一代P-gp 抑制剂是一批以钙离子通道抑制剂维拉帕米和免疫抑制剂环孢菌素A为代表的口服药物。还有普罗帕酮、奎尼丁、红霉素、氯丙嗪、咖啡因、利血平、育亨宾和他莫昔芬等等。基于人空肠切片做实验,发现奎尼丁、环孢菌素A 和维拉帕米增加了空肠中罗丹明123 的累积,即这3 种药物使罗丹明123 的AUC 增加了,并且罗丹明123 的累积量的增加呈浓度相关性。
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问
请教各位大神这是什么菌污染
Eason老歌迷
可能是黑胶虫污染。在细胞培养的时候,有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动(类似布朗运动)。
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问
培养的293T细胞总是会出现如图的棒状结构,越来越多。 细胞仍然可以生长 ,求教这种是什么污染该怎么解决 谢谢~
whilt-shirt
可以用PBS多洗几遍,或者增加双抗浓度试试
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问
中提质粒有非特异性条带
bamboopiggy
你buffer1 里面加RNase了么?去除rna试试
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问
小鼠脑片 Nav1.6 染色
实验小助理静静
已通过审核,谢谢您的经验分享~
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叠氮化钠在一抗稀释液中的作用
balalaLy
防腐作用。可以不加的话尽量不要加。可能会对蛋白有一定的影响。
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谷氨酸棒状杆菌基因整合
Eason老歌迷
不用!不用加终止子,你加完之后他有的基因没表达会有影响的。
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H9C2细胞用cck8做细胞生长曲线出现的问题
Eason老歌迷
感觉是你的个人操作问题。另外提个建议,做生长曲线为什么用CCK-8?直接对细胞计数多直接可靠?我建议你用细胞计数法,最具有说服力,谁也不会有疑问。平行养多皿细胞,每间隔一段时间收细胞计数,每个时间点3次重复。做个折线图,很方便的。
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Cck8与六孔板结果相反
Eason老歌迷
不知道你有没有看过一篇文献,药物积聚程度与细胞死亡相关。还有一种可能,我觉得是不是你在6孔板中加药的浓度没有计算好。
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氯化锂-匹罗卡品慢性癫痫模型 求助
bamboopiggy
应该做预实验,把小鼠拿到实验室,随时观察。实在不行可以申请动物房进行小鼠行为监测
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小鼠肝脏HE切片求助
Eason老歌迷
我感觉没啥太大差异,可能是你切片的时候没切好,切碎了,这个一般是不会有形态学上的大的差异。主要靠生化指标。如果是看药物的毒性反应,各组有明显的肝脏毒性差异才能算有效果。
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