实验问答22,453,302 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问RAW264.7分化？

土井挞克树

你这个没有分化，镜下视野几乎都是杂质和细胞碎片，细胞裂解过多，你需要重新做

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问养细胞经验交流

土井挞克树

HCEC-B4G12人角膜内皮细胞培养条件加入新鲜的完全培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养。细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）1、将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀。2、吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿。3、分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基，使细胞密度保持5×10（5）/ml左右。4、注意培养基PH值变化情况和细胞密度，定期半

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问细胞实验中，AMPK抑制剂选择浓度时，如果用CCK8检测，怎么选择浓度？

balalaLy

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问求助！！！提取T细胞染菌

土井挞克树

这个细胞看起来就像是细菌的形态，如果高压蒸汽灭菌合适，那么会不会是样本污染。

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问组织冰冻切片ROS荧光染色，细胞形态完全没有了，完全一团糊，有谁知道啥原因吗

土井挞克树

你这个视野没有看到细胞呀。那么有可能细胞没染上，有可能细胞死亡，不过倾向于染的都是杂质，没看到细胞

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问请问293细胞在3.5厘米皿长满有多少细胞？

bamboopiggy

你看要长多密了，293细胞比较小，3.5cm的皿长满，可以到3-10x10^6

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问求大神回复：”生物安全柜的类型和区别“

土井挞克树

一级生物安全柜主要是保护工作人员和环境的，对于样品的保护作用不大，本身没有风机主要是依赖外接的通风管中的风机来带动气流，但是由于不能保护样品，所以使用很少。二、二级生物安全柜：　　这是目前广泛流行的一种类型，按照入口气流风速、排气方式和循环方式主要可以分为A1、A2、B1、B2四种类型，可以对工作人员、环境、样品进行很好的保护。三、三级生物安全柜：　　三级生物安全柜主要是为4级实验室的生物安全等级

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问请教关于细胞冻存（异丙醇冻存盒）的问题

此用户已注销

会有些影响,在活率方面.70%的细胞应该没问题. 1）传统方法:冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h (或隔夜)--->液氮中长期储存. 注意：-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些. （2）程序降温：利用已设定程序的程序降温仪以-1～-3℃/min的

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问细胞状态不好

土井挞克树

我觉得你的细胞太多了，肿瘤细胞繁殖快，需要定期梳理，可以考虑多用培养基。

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问组胚求助科研大佬HE染色

土井挞克树

实验手册上建议是30min-1h（小组织块），但是如果冲水前的过水步骤省略，需要再延长20-30min

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问短肽能否作为原料直接参与蛋白质的生物合成

土井挞克树

当然可以了，短肽就是氨基酸拼成的，你甚至可以多个短肽连接成一个蛋白，现在的技术可以做到的

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问细胞活力

bamboopiggy

你怎么确定你6孔板和96孔板细胞的密度是一样的？一般，你要控制加液体的体积，药物浓度，以及细胞数，即使计算出来细胞的活力在50%，也是个相对数，大概在6孔板中，可能活力在50-70%，虽然细胞死了，已经没法和cck8反应了，但是不一定是飘在培养基中，可能还是贴壁状态。肉眼看是看不出来的。

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问求助|pha刺激pbmc后细胞贴壁，完全吹不下来

bamboopiggy

是的，刺激以后帖壁，如下要弄下来，就胰酶消化。

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问大鼠阴道涂片

灵枢天问

感觉没有正常形态，没有尾部那些线状也是卷曲状，不太像

4 回答2011 围观

问CD31染小鼠肝脏

piperer

超过70%的p16细胞存在CD31，提示它们是血管内皮细胞。

3 回答987 围观

问脊髓小胶质细胞疑问

土井挞克树

CD11b 与 CD45 组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11bhi 和 CD45low，而巨噬细胞为 CD11bhi 和 CD45hi。

3 回答1184 围观

问求助：μg/mL怎么转化为μmol/L

bamboopiggy

粉防己碱分子量 622.75 1.5μg/mL=2.4087μmol/L三氧化二砷分子量 197.84 1.25μg/mL=6.3182μmol/L

4 回答9073 围观

问求问这个细胞是真菌污染了吗?

bamboopiggy

是污染了，你别用了，换新的吧。

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问求大神回复：干细胞培养时，有多少种从组织中获取干细胞的方法？

Eason老歌迷

分为多种干细胞的，如果是造血干细胞或骨髓间充质干细胞，最常用的，主要取骨髓，进行分离培养。如果是表皮干细胞，这个只处于研究阶段，只要取1mm2的皮肤就够了，如果是其他成体干细胞，如胰腺干细胞，精原干细胞，乳腺干细胞等，也要在特定组织内分离。

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问你们好，我想请教一下关于植物细胞悬浮培养的以下问题？实验小白，请大家不吝赐教，谢谢。

灵枢天问

不一定要单细胞，细胞团也可以但是要尽量小，从愈伤组织得到分散细胞用果胶酶比较好

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