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科研学霸天团，48小时有问必答

问细胞免疫实验

土井挞克树

不加T细胞靠体内免疫应答分化的T细胞理论上是可行的，但是免疫调控的通路很多。有可能同时存在多种免疫细胞的活化。加T细胞可以避免这个问题。

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问关于细胞培养的一些问题（为什么培养基保存于4℃冰箱中，颜色会偏暗红色）

土井挞克树

因为温度降低时二氧化碳相对减少，培养基会碱性增大

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问微管在高钙低镁情况下倾向于聚合为什么要使用EGTA去螯合钙离子呢？

土井挞克树

钙离子抑制微管聚合，对微管解聚有促进作用，因而，在微管相关的实验中，都要加入EGTA来特异性的螯合反应体系中可能含有的钙离子。

3 回答659 围观

问LC3这种形状是什么原因呢

paj12345

Wb拖尾条带可能提示:分离胶浓度过高或者上样量偏多，样本降解，或者电泳液反复使用等等;

3 回答493 围观

问LC3这种形状是电泳时间太久跑散了么

土井挞克树

这个反映时间太长，缩短时间再跑一下。

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问请问有无KDELR和GFP融合蛋白的购买或者文献报道呀？

土井挞克树

可以参考一下这篇文章具有穿膜和定位功能的新型重组蛋白TAT-GFP-KDEL的表达及其功能研究

1 回答362 围观

问菌液保存在-80没加甘油，取出之后还可以提质粒吗

dxyc42u

不全挂，也挂得差不多了…加甘油是为了抗冻，保护细菌。在冻存的时候，水形成的冰晶会对细胞造成很大的伤害，甘油可以结合水。

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问求问7000左右的质粒跑电泳跑出来大小怎么会在8000左右，是我哪方面的问题吗

土井挞克树

可能混有干扰质粒或者有核酸片段干扰。

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问BV2细胞复苏之后一直没有长触角，养了几天之后有伪足是怎么回事？

dxyc42u

可以结合其他实验，如检测NO、IL-13等炎症因子的表达，来确定BV2是否被定向激活

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问细胞消化过度了怎么办

NatureBios

胰酶本身就是用来消化细胞和培养瓶的连接的蛋白，多10s会有些影响，不过不会很大的，正常养细胞也会有细胞死亡，将死细胞去除掉，剩下的好好养就可以了

3 回答2607 围观

问蛋白质体外磷酸化怎么终止反应？

土井挞克树

可以加抑制磷酸化的酶终止试一下。

1 回答1028 围观

问求助！脓毒症性心肌病细胞模型LPS诱导H9C2

五块钱的丸砸

我也是做这个实验，同问，同学现在做的怎么样了啊，你还能看到这里的回复吗

4 回答1947 围观

问大神们帮俺看看是不是细胞污染

balalaLy

看细胞形态应该长得还行，如果只是细胞内有黑点应该不是污染。

3 回答293 围观

问给大鼠做磁刺激怎么固定老鼠？

土井挞克树

需要麻醉的，常规的神经镇静药就可以，麻醉后固定在架子上。

3 回答526 围观

问有人知道最下面两个是死胎和还是畸形胎吗

huarenqiang5

肉眼观察都不太像，建议用高倍显微镜下观察确定。

2 回答339 围观

问自噬与ELISA

dxyc42u

可以，但是试剂盒不好买，国内知名的几家都没有。还是考虑进口产品吧

3 回答432 围观

问『求助』为什么用生理盐水也可以使细胞重悬

dxyc42u

生理盐水的渗透压和细胞悬液的渗透压基本一致.生理盐水有时候也需要配制成不同的浓度,比如处理人血红细胞的时候需要配制0.9%的生理盐水,而处理大多数鱼类血红细胞的时候需要配制0.75%的生理盐水.浓度过大会导致细胞失水,浓度过小会使细胞吸水,导致细胞涨裂.

3 回答1322 围观

问细胞形态

土井挞克树

我看着像是分裂期的细胞，或者可能是胞质中的大分子

2 回答479 围观

问微管免疫荧光染色

申东熙老伯

可能是封闭问题，用5%的BSA或者山羊血清封闭。

3 回答2054 围观

问HSF细胞生长缓慢解决办法？

dxyc42u

试一试增加起始培养细胞浓度，换入新鲜配制培养液看看可以吧

3 回答712 围观

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