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        jak2/stat3通路的qpcr和wb检测具体包括包括哪些?

        相关实验:MARK 信号通路

        user-title

        纣业

        wb大概知道,感觉是jak2和stat3以及他们的磷酸化?

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        2 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        JAK2/STAT3通路涉及的一些重要因子包括:


        JAK2(Janus激酶2):是一种重要的酪氨酸激酶,参与调节细胞增殖、分化、凋亡和免疫应答等生物学过程。


        STAT3(信号转导和转录激活因子3):是一种转录因子,能够调节基因的转录,参与细胞的增殖、分化、凋亡和免疫应答等生物学过程。


        SOCS(抑制器蛋白):是一组负调节蛋白,能够抑制JAK2/STAT3通路的信号转导和转录活性,维持细胞内的稳态。


        PIAS3(蛋白质抑制剂AS3):是一种抑制因子,能够限制STAT3的转录活性,参与调节细胞的增殖和凋亡。


        SHP-1(酪氨酸磷酸酶1):是一种酶,在JAK2/STAT3通路中具有重要的负调节作用,能够通过去磷酸化的方式抑制JAK2和STAT3的活性。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        对于JAK2/STAT3通路的qPCR和WB检测,具体包括以下内容:

        qPCR检测:

        提取RNA,并进行逆转录反应合成cDNA

        设计针对JAK2/STAT3通路关键基因的引物,进行PCR扩增

        将扩增产物分离并定量,用于表达水平的定量分析

        可以进行相对表达或绝对表达水平的分析

        WB检测:

        提取蛋白质,通常使用RIPA溶液提取全细胞蛋白

        将提取的蛋白质分离,通常使用SDS-PAGE电泳

        将分离的蛋白转移到膜上,通常使用PVDF或NC膜

        进行蛋白的特异性检测,通常使用特异性一抗结合,再使用二抗进行信号放大

        通过相对分子量大小和信号强度,进行蛋白表达水平的分析。

        需要注意的是,具体分析中所选用的关键基因、蛋白及其抗体,以及浓度和条件等细节,需要根据实验具体设计来确定。

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