WB结果和IF无法对应

我有一个核蛋白指标，根据文献所述，该蛋白需要磷酸化，入核发挥作用，于是我们进行了细胞免疫荧光实验和WB实验（核浆分离）

但，根据IF实验结果，该蛋白几乎完全表达在细胞核内，细胞浆几乎不表达，如下图1所示（DAPI-蓝色，目的蛋白为红色）

然而，进行核浆分离的WB实验结果可见，该蛋白在细胞浆内表达，且多次重复结果一致

想请问大家IF实验需要如何调整？

图1

图2