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我想问下各位大佬,有没有比较好的IL4诱导raw264.7向M2型极化的方法?具体浓度和孵育时间是怎样?细胞的状态需不需要注意什么?是无血清孵育还是含有血清孵育?求助
高山云初
10ng/mL IL-4作用12小时诱导其极化。
周末也要努力呀
可以使用以下方法:
1. 培养基准备:使用DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素。
2. 细胞培养:将RAW264.7细胞在培养皿中以37°C、5% CO2的条件下培养至80-90%的密度。
3. 细胞处理:将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次,然后加入IL-4(10 ng/ml)处理培养基中。将细胞继续培养24-48小时。
4. 细胞采集:将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次,然后用细胞刮刀将细胞从培养皿上刮下。
5. 细胞检测:使用流式细胞术或免疫荧光染色等方法,检测M2型巨噬细胞标记物,如CD206(Mannose Receptor)和Arginase-1等。
橙汁儿青柠味
一般是20ng/ml直接加到培养基里诱导24h
土井挞克树
一般是20ng/ml,IL4诱导孵育24h
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