小鼠巨噬细胞极化的诱导及鉴定

实验分类：

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

巨噬细胞可以发生不同性质的功能活化（极化），成为具有不同表面分子和功能特征的 M1 和 M2 亚群。M1 型巨噬细胞是 Th1 型免疫反应过程中产生的效应巨噬细胞，主要由微生物产物（如 LPS）或干扰素γ（IFN-Y）诱导产生。其特点是分泌一化氮（NO）、反应性氧中介物等杀伤分子和多种炎症因子（IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α和 Type IIFN 等）以及趋化因子（CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL16、CCL2、CCL3、CCL4 及 CCL5 等）。此外，巨噬细胞在 IFN-Y 刺激下，可增加诱导型一氧化氮合酶（inductible nitricoxide synthase，iNOS）的分泌，还能表达大量的 CD16／32、MHC II、CD40、CD80、CD86 及 B7 等分子，进而参与提呈抗原和激发 Thl 型免疫应答，杀伤感染病原体和肿瘤细胞。因此，通常认为 M1 型巨噬细胞是机体免疫防御和抗肿瘤的强有力的效应细胞。

M2 型巨噬细胞在不同的诱导信号下将分化为不同的亚型，包括：

①M2a 型，刺激信号是 IL-4 和 IL-13，诱导 Th2 型免疫反应，在过敏性反应和寄生虫感染免疫中起主要作用。

②M2b 型，刺激信号是免疫复合物和 Toll 样配体（如 LPS）或 IL-1R 配体，介导 Th2 型活化和免疫调控。

③M2c 型，刺激信号是 IL-10 和糖皮质激素，介导免疫调控，参与基质沉积和组织修复。

M2 型巨噬细胞的特征表型为 IL-10 hih、IL-12low、IL-1rahih、IL-1decoyRhigh，可分泌趋化因子（如 CCL17、CCL18、CCL22），并特异性表达一些基因，如 1 型精氨酸酶（arginasel，Arg1）编码基因，高表达甘露糖受体 CD206、清道夫受体，此外，还会上调 YM1 和 YM2（几丁质酶家族成员）、FIZZ1 等分泌蛋白的表达。M2 型巨噬细胞抗原提呈能力差，并通过下调 M1 型巨噬细胞的功能等方式控制人体的炎症反应。与此同时，M2 型巨噬细胞具有修复损伤、促进血管形成以及组织重构的作用。

原理

小鼠巨噬细胞极化的诱导的基本原理是分别采用相应的诱导剂对巨噬细胞极化进行诱导；通过对 M1 和 M2 型巨噬细胞表型相关指标的比较分析，可评价和鉴定巨噬细胞类型的表型，如 M1 型标志（CD16／32、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-12、NO 及 iNOS 等）、M2 型的标志（CD206／mrc-1、IL-10、Arg-1 及 Yml 等）。

来源：丁香实验团队

操作方法

小鼠巨噬细胞极化的诱导及鉴定