• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        体内活化巨噬细胞

        相关实验:体内活化巨噬细胞

        最新修订时间:

        简介

        巨噬细胞是体内重要的天然免疫细胞,体外检测其功能并不能完全反映其体内行为,而检测某些药物的实际效应,又往往需要体内测定巨噬细胞活性。以细菌内毒素 LPS 活化巨噬细胞为例,LPS 是一种脂类和多糖的复合物,是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,是内毒素和重要群特异性抗原。LPS 通过诱导单核-吞噬细胞系统的活化,大量释放 TNFα、IL-6 等多种促炎症细胞因子导致脓毒症、脓毒症休克,甚至死亡的发生。TLR4 是单核-吞噬细胞系统识别 LPS 的主要模式识别受体。

        原理

        体内活化巨噬细胞的基本原理是 LPS 是一种脂类和多糖的复合物,是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,是内毒素和重要群特异性抗原。LPS 通过诱导单核-吞噬细胞系统的活化,大量释放 TNFα、IL-6 等多种促炎症细胞因子导致脓毒症、脓毒症休克,甚至死亡的发生。TLR4 是单核-吞噬细胞系统识别 LPS 的主要模式识别受体。

        材料与仪器

        动物:

        6~8 周龄昆明小鼠

        试剂:

        生理盐水,2 μg LPS(溶于 1 ml NaCl

        仪器:

        注射器

        步骤

        体内活化巨噬细胞的基本过程可分为以下几步:

        (1)将小鼠随机分为 2 组,分别给小鼠腹腔注射 1 ml 生理盐水和 1 ml LPS 溶液,12 小时后,小鼠脱颈椎处死,分别回收腹腔巨噬细胞和腹腔液。

        (2)Griess 法检测腹腔液 NO 水平;ELISA 法测定腹腔液 TNF-α。

        (3)采用贴壁法培养腹腔巨噬细胞,同时在培养液中加入荧光微球,37 ℃ 培养 1~2 小时,利用流式细胞术观察巨噬细胞吞噬能力。

        (4)可以同时分析 IL-12、IL-10、iNOS 及 Arg-1 等鉴定其活化类型,每个实验至少重复 3 次。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序