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        求助,巨噬细胞怎么转染

        相关实验:体内活化巨噬细胞

        user-title

        dxy_trllw4r9

        目前试了lipofectmine2000,磷酸钙,还有翌圣的脂质体转染试剂,转染RAW264.7和BMDM效率都很低。我一般在转染前24小时铺板,6孔板铺30万或50万/孔,转染试剂用量都按照说明书,哪位比较有经验可以分享一下实验方法,谢谢!

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        3 个回答

        user-title

        dxy_r56tuo3e

        有帮助

        请问最后转进去了吗?怎么转的?

        user-title

        sswei

        有帮助

        操作方法如下:

        1、BMDM巨噬细胞置于 6 孔板中;

        2、密度为 2.5 × 105细胞;

        3、细胞转染密度为 70%;

        4、10 µL siRNA (100 pmol/mL) 和10ul转染试剂室温混合恒温 15 分钟;

        5、然后加入含有 1ml 的正常 DMEM培养基到 6 孔板;

        6、24 小时后换成新鲜 DMEM培养基继续培养;

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        这个细胞就是比较难转染,需要多摸索条件,实在不行用病毒吧

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