FIIC标记的抗原如何用于抗体的流式分选？

可以通过做同型对照，然后间接标记法进行FIIC抗原的流式分选

不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例：PE ＞APC ＞PE-Cy5 ＞PerCP ＞FITC ＞PerCP-Cy5.5，通常来说，PE最强，适用于弱表达抗原。FITC强度较弱，适用于强表达抗原，使用范围比较广。需根据检测的目标蛋白进行具体选择。

具体步骤如下：

准备FIIC标记的抗原和未标记的抗原，以及抗体和细胞样品。

将未标记的抗原与FIIC标记的抗原按照一定比例混合，以获得不同的FIIC标记抗原浓度。可以通过流式细胞仪预测试验，选择适当的标记浓度。

将FIIC标记的抗原加入到含有抗体的细胞样品中，充分混合，使抗原与抗体形成复合物。

用流式细胞仪进行检测，选择荧光标记的波长范围，并设置门控条件，将复合物含有荧光的细胞分选出来。在分选过程中，可以使用前面的预测试验所得到的标记浓度，以获得最佳的分选效果。

需要注意的是，FIIC标记的抗原与未标记的抗原必须有相同的免疫原性，以确保标记不会影响抗原与抗体的结合和特异性。此外，在流式分选过程中，需要在荧光通道中使用与FIIC标记抗原相应的波长范围，并根据实验需要选择合适的门控条件。