进行免疫荧光染色实验时，动物组织没有固定直接放OCT里了，冰冻切片后需要再固定吗？

组织不固定直接OCT里，冰冻切片需要再固定。

切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。

如果之前没有固定的话，后续冰冻切片需要固定

如果您在进行免疫荧光染色实验时，动物组织没有进行任何固定，直接放入OCT中，然后进行了冰冻切片，那么在染色前最好进行一次固定。

没有固定的组织在切片后容易出现变形、移位、膨胀等现象，这些情况可能会对染色的结果产生影响，导致不可靠的结果。因此，固定组织可以保持其形态和结构的完整性，有利于保证染色结果的准确性和可靠性。

一般来说，常用的固定方法包括乙醛固定、甲醛固定、乙酸乙酯固定等。具体选择哪种固定方法取决于您要染色的蛋白质性质和实验需要。

总之，如果您的组织没有固定，最好先进行一次固定，然后再进行免疫荧光染色实验。这样可以提高染色结果的可靠性和准确性。