T细胞亚群的诱导分化
免疫学实验
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简介
T淋巴细胞是介导细胞免疫的关键细胞，在机体对抗外来抗原与病原体入侵过程中发挥着重要作用。
T淋巴细胞主要由CD4＋T细胞和CD8＋T细胞组成，CD4＋T细胞又被称为辅助性T细胞（helperT cell，Th），其识别抗原受MHCII类分子限制，在功能上可辅助B细胞产生抗体，辅佐CD8+T细胞免疫应答，以及通过分泌各种细胞因子发挥免疫调控功能。
根据表达的转录因子及分泌细胞因子的不同，CD4＋T细胞又分为Th1、Th2、Th17、调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）及滤泡辅助T细胞（Tfollicular helper cells，Tfh）等。
CD8T细胞又称杀伤性T细胞（cytotoxic T cell，CTL），其识别抗原受MHCI类分子限制，在功能上可杀伤病毒或胞内细菌感染的靶细胞以及肿瘤细胞等，是细胞免疫的重要效应T细胞。
原理
Th1和Th2细胞的分化诱导的基本原理是抗原特异性Th细胞反应常用以下两种模型。
一是以同种异型细胞作为抗原诱导同种异型T淋巴细胞反应；另一种则为可溶性抗原在同型的抗原提呈细胞提呈下，诱导TCR转基因小鼠来源CD4T淋巴细胞反应。
Th1的诱导需要加入IFN-Y、IL-12与抗IL-4，而Th2的诱导需要加入IL-4、抗IFN-y与抗IL-12。在相应的培养条件下诱导4天以上即可培养出相应的Th1或Th2细胞。
Th17细胞的分化诱导的基本原理是先将Th0细胞进行活化，同时加入TGF-β、IL-6、抗IFN-y和抗IL-4等相应的条件促进Th17的分化。
另外有些对Th17的分化发育与功能具有重要作用的细胞因子，如IL-23和IL-21，也可被加人到诱导分化的过程中。
调节性T细胞的分化诱导的基本原理是Treg细胞可以通过初始T细胞活化，同时受到抗CD3抗体、抗CD28抗体、IL-2、TGF-β和IL-10等共刺激信号的刺激诱导产生。
来源：丁香实验团队
操作方法
初始CD4T细胞（即Th0细胞）在特异性抗原或特异性活化剂的作用下活化、分化为不同的Th细胞亚群，如Th1、Th2、Th17等。Th1细胞通过分泌IL-2、IFN-y和TNF-β等细胞因子介导细胞免疫效应，在诱发以炎症反应为特征的器官特异性自身免疫病、器官移植排斥反应和抗感染免疫中发挥重要的作用。Th2型细胞通过分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13等细胞因子介导体液免疫，Th2
Th17细胞的分化诱导一类CD4T细胞主要分泌IL-17，表达控制其分化的独特的转录因子-孤独受体（orphan nuclear receptor，RORYt）。Th17细胞分泌IL-17，刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞和巨噬细胞等分泌多种细胞因子，趋化和募集中性粒细胞和单核细胞，诱导局部炎症反应。因此，Th17参与了炎症反应、感染性疾病以及自身免疫性疾病的发生发展。另一方面，IL-17刺激上皮细胞、角朊细胞分泌防
调节性T细胞的分化诱导调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）是一类具有较低增殖能力，能够抑制免疫反应的细胞群，在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面发挥重要的作用。Treg细胞在体内外具有调节功能，根据其表面标记、产生的细胞因子和作用机制的不同，Treg细胞可分为两类，一类是自然Treg细胞，即天然生成CD4＋Treg细胞，另一类为适应性Treg细胞，它包括Tr1细胞、T
滤泡辅助性T细胞的分化诱导滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells，Tfh）是主要负责辅助B细胞的T细胞亚群。Tfh上表达的CD40Lhi和ICOShi分别通过与B细胞上CD40和ICOSL结合，以及Tfh所分泌的IL-21，在刺激B细胞增殖、分化以及免疫球蛋白类别的转换中起着十分重要的作用。此外，表达CXCR5的Tfh在淋巴滤泡处产生的CXCL13趋化下，被募集到淋巴滤泡并与B细胞共定位和相互
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