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        用HepG2 2.2.15细胞筛选抗乙肝药物

        相关实验:用流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离分泌细胞因子的细胞

        user-title

        dxy_tnvyw8m3

        模型要怎么建啊大家,救救孩子

        wx-share
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        3 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        抗 HBV 药物的活性筛选选用 HepG2 2.2.15 细胞及 DHBV 阳性鸭血清感染北京芙蓉鸭两种模型,检测体外药物对病毒抗原表达的抑制作用、药物对鸭血清 DHBV DNA 的抑制作用。
        体外抗 HBV 药效检测
        材料与方法

        1. 体外细胞模型: 乙型肝炎病毒(HBV)转染的 HepG2 细胞, 即 HepG2 2.2.15 细胞。
        2. MTT法检测样品对细胞的毒性。
        3. 酶联免疫法 (EIA) 检测样品对 HBsAg 和 HBeAg 的抑制作用。
        4. 阳性药物对照: 拉米夫定(3TC)。
        5. RT- PCR 检测 HBV-RNA/DNA

        试验过程

        1. 药物的细胞毒性检测HepG2 2.2.15 细胞在 96 孔细胞培养板中培养 48 小时后,加入不同浓度含药培养液,继续培养 9 天,用MTT法检测细胞存活率,确定药物对HepG2 2.2.15 细胞的毒性浓度。
        2. 药物对 HBV 病毒抗原抑制作用检测HepG2 2.2.15 细胞在 24 孔细胞培养板中培养 48 小时后,加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液,继续培养,在培养第9天收集上清液,用 HBsAg 和 HBeAg 诊断试剂盒)检测 HBsAg 和 HBeAg。用 RT- PCR 检测 HBV-RNA/DNA 复制数。

        体内抗鸭乙肝病毒(DHBV)药效检测

        材料与方法:

        1. 动物模型:北京芙蓉鸭。
        2. 病毒: DHBV 阳性鸭血清。
        3. 阳性药物对照: 拉米夫定(3TC)或自选对照药物。
        4. 地高辛高引物 DNA 标记与检测试剂盒。

        试验过程

        一日龄鸭北京芙蓉鸭挑选阴性鸭经胫静脉感染 DHBV 阳性鸭血清,再筛选出 DHBsAg 阳性芙蓉鸭,给予药物,共给药 10 天,于第 5、10 天及停药后 3 天采血,用 southernblot 检测鸭血清DHBV-DNA 水平。根据病理切片观察肝脏病变情况。计算DHBV-DNA抑制%和肝病变抑制%,评估测试药物的抗病毒及减轻肝损的效果。

        user-title

        dxy_tnvyw8m3user-title

        你好,我可以问一下为什么是九天这个时间点么?因为我看文献也注意到了这个,时间周期感觉很长,所以想问一下原因

        user-title

        Dr_劉医生

        有帮助

        有人做过相同的实验模型,你直接下载看看:

        陈宝敏,傅希贤. 2.2.15细胞株筛选抗乙型肝炎病毒药物的体外实验研究进展[J]. 中国中西医结合杂志,1997, (5):316-318.

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以动物建模,比如一般使用北京芙蓉鸭。

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