有哪些因素会导致非特异着色问题？

一抗孵育过久，浓度太高，封闭时间短，干片。

一抗孵育时间太长，抗体孵育完，清洗不够充分

一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。每次使用新抗体前应该多做预实验，摸索出zui理想的工作浓度，不能简单地按照说明书来用。另一个常见原因就是孵育时间过长。解决的办法就是定时器。加上抗体后，立刻调好定时器，提醒自己及时终止反应，就会避免这个问题。

1. 抗体的特异性
2. 封闭环节
3. 清洗环节
4. 做好空白对照