有的抗体在做IF时，效价很低，做wb时效价很高，说明书写明可以做IF和wb，种属也没问题，出现的原因？

这是抗体的原因，建议更换抗体试试

PE荧光素可能冰冻过。如果冰冻过，建议另外买⼀管新的抗体。

(2)多聚甲醛（PFA）可能会导致此问题。PFA降解后可释放出甲醇，从⽽影响染⾊。所以切记PFA尽可能新鲜配制，或者细胞尽可能不要固定，染完⾊就⽴即检测。

虽然说明书上说可以同时做if和wb，但是他俩的抗体要求还得不太相同。WB的蛋白经过加热变性之后都变成线性的结构。因此zui 好的抗体是采用非常特异序列的人工合成多肽的方法来做实验，结果也非常特异。免疫荧光和免疫组化中需要进行固定一步，固定是为了尽量让细胞的形态结构维持和原有的一致。这种化学物质的固定使蛋白质变性凝固，与天然状态下的蛋白质有了一定的区别，但是又不同WB中加热变性变成了线性的结构。因此在做IF/IHC实验中，最合适的抗体可以是纯化的重组蛋白得到的抗体，也可以是人工合成多肽得到的抗体（多肽是在蛋白质的表面）

可以做不代表能做出来，也许人家验证做IF的细胞是比较好表达的，而你的细胞不是很好表达但也可以做的那种，多试几次比较好