蛋白一直跑不出来，出来的位置也不太对

位置不对可能得原因有：

1.胶浓度不对，不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差，可以调整浓度

2.抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度，延长孵育时间

3）酶失活，建议直接将酶和底物进行混合，如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物

4）目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体，建议查询相关文献确定

5）标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建议设置阳性对照比对结果，增加标本上样量

1.这个要看你买的哪个公司的抗体，先去看公司给的说明书，有时候，预测的大小和实际抗体能detect到的位置是有偏移的。2.如果第一次不知道大小的话，建议跑个全膜。3.如果150那里的趋势一致的话，倒是可以用。

首先要判断上样蛋白浓度够不够，再分析marker有没有问题