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        在免疫组化制片的时候有什么办法能让组织完整无刀痕?脑组织切片厚度多少才是最佳的?

        相关实验:免疫组化

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        RIRI00

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        3 个回答

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        菲菲飞呀飞

        有帮助

        想要免疫组化制片的时候让组织完整无刀痕,必须保持切片刀锐利,切片要薄而平整、无皱摺、无刀痕,如有上述问题的切片在进行免疫组化染色都将出现假阳性现象,切片厚度一般为3~4μm,切好的切片在60℃温箱中过夜,注意烤片的温度不宜过高,否则易使组织细胞结构破坏,而产生抗原标记定位弥漫现象

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        府宅

        有帮助

        切片角度和刀片新旧程度对切片效果的影响较大,切片角度视切片机型号而异;新刀片容易切出完好的切片。大鼠大脑要做免疫组织化学的话,需要把细胞切开,抗体容易进到胞质(如果是胞核染色则需要进一步核膜打孔,跟细胞膜打孔一样,常用triton x-100),一般神经细胞的胞体的大小差异很大,小的直径仅5~6μm,大的可达100μm以上,结合文献会发现,经常切30um或者20um,这样可以切开多数的细胞

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        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        脑组织需要较厚(尤其是取新鲜标本冰冻制片时),常规都要6-8um最佳,冰冻可切至10um。神经组织的研究要求切片厚度在20-100μm,有利于追踪神经纤维的走行。

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