染色最重要的操作步骤是哪个

样本前期处理和敷抗体都是关键步骤。

染色最重要的步骤是首先要在细胞固定良好的基础上严格评估染色细胞核和细胞浆的试剂是否能够良好的着色，有无其他的结晶。要进行染色前的质控另外，要注意染色时间，也要注意环境的温度

我认为染色关键步骤是脱色。因为在染色时，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌，会导致结果不准确。

染色其实无非是样品前处理，染色，洗涤，检测四部。前处理主要目的是为了让样本打到染色条件，例如流式就牵涉到目的细胞的提取，单细胞悬液的制备，破细胞膜和核膜等；IHC就牵涉到包埋、切片，破膜等。染色又牵涉到抗体的浓度，抗体的特异性和有效性，染色条件等。洗涤和检测是固定程序，难度较小。主要是样本的前处理和染色步骤会需要更多技巧