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        病原微生物染色实验

        实验分类:

        免疫学实验

        最新修订时间:

        简介

        病原微生物的种类繁多,包括属于真核微生物的真菌、厉于原核微生物的细菌(抗酸杆菌)、来自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。这些物质的化学成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通过氧化剂或直接加热条件下,可使染色剂与物质结合而形成牢固的复合物。


        内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》


        来源:丁香实验

        操作方法

        真菌

        高碘酸氧化剂:高碘酸 0.5 g,蒸馏水 99 ml。Schiff 试剂染色液(参见糖原染色液)。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 高碘酸氧化剂处理 10 min,流水洗 2 次。3. 蒸馏水洗 2 次,Schiff 试剂染色液处理 20 min 左右,15℃ 以下时在湿盒内加入 50℃ 温水,可加快染色时间。4. 浸入自来水洗 2 min,明矾-苏木精进行复染 10 s。5. 无水乙醇脱水

        细菌

        苯胺油-石炭酸-复红染色液:碱性复红 0.5 g,苯胺油 1 ml,石炭酸(苯酚)1 g,30% 乙醇 70 ml。先将碱性复红溶解于乙醇,加热、冷却后再加入石炭酸和苯胺油。革兰碘液:碘片 0.5 g,碘化钾 1 g,蒸馏水 150 ml。结晶紫染色液:结晶紫 2 g,95% 乙醇 20 ml,草酸铵 1 g,蒸馏水 80 ml,分别将结晶紫溶解于乙醇,草酸铵溶解于蒸馏水,然后进行混合,可使用较长

        抗酸杆菌

        石炭酸-复红液:碱性复红 1 g,纯乙醇 10 ml,石炭酸(5%)水溶液 100 ml,碱性复红溶于乙醇内,然后与石炭酸水溶液混合,用前过滤。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 浸入石炭酸-复红液 1 h,于 37℃ 或 56℃ 温箱内 30 min。3. 自来水洗,蒸馏水 1 min。4. 用 0.5% 盐酸乙醇液分化,浸入自来水洗 1 min。5. 蒸馏水洗,0.1% 亚甲蓝水溶液处理

        乙型肝炎表面抗原

        地衣红染色液:地衣红 1 g,70% 乙醇 95 ml,浓盐酸 5 ml。充分溶解后,调 pH 值为 1.2~1.6 即可。酸性氧化液:高锰酸钾 0.5 g,盐酸 0.15 ml,蒸馏水 10 ml。草酸溶液:草酸 2 g,蒸馏水 100 ml。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 酸性氧化液处理 5 min。3. 自来水洗后用草酸溶液漂白 5 min。4. 蒸馏水洗 3 次。5. 浸入 70%

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