请教ELISPOT斑点模糊问题
丁香实验
最近在做鸡IFN-γ ELISPOT实验，但是结果总和图12一样，第一排都是阳性刺激结果和第三排阴性对照一样都是模糊的色团，请问有见过这种问题的吗？图3是买的包好的板子，斑点就很明显，但是是小鼠的。
4 个回答
西柚味的芋圆
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我的推测是包被的抗体的问题。你这个我自己包被的时候遇到过，但是已经包被好的板子这样的话，不知道原因，是不是没洗干净呢，洗板液要用PBS不能用PBST
txs900416
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主要考虑抗体效价是否合适，此外洗涤方式是否彻底也很重要
dxy_0mxazdaw
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一方面有可能洗涤条件不够合适，另一方面抗体浓度可能不够。建议适当增加洗涤次数和时长，并且抗体浓度应该做一个梯度，选出能够出现清晰点的抗体浓度。
sk1981521
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应该是种属差异性问题，你买的是小鼠的试剂盒，而检测的是鸡的
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