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科研学霸天团,48小时有问必答
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做植物ChIP,用溶液二洗核时上清是透明的,但是沉淀还是绿油油的,感觉洗不掉,为什么?
yu脚踏实地
细胞破碎不完全,破碎不充分,细胞质没出来,然后不行
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请问免疫组化显示的时间是多长时间?
bamboopiggy
你做预实验直接摸一下条件,每个人的反应都不一样。一般一抗过夜,二抗室温1-2个小时。
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求助!!用ova蛋白做SDS-PAGE跑不出条带是什么情况
汤姆卜丽波
也不太可能一条都没有,是不是你操作过程中蛋白降解了
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求助:SD大鼠的运动和感觉传导通路?和人的类似吗?
Dr_劉医生
做左旋多巴诱导的PD小鼠,一般可以用甘松做Nrf2和D1R-ERK 2条信号通路,具体实验方法参考这份资料“基于Nrf2/D1R-ERK信号通路探讨甘松对左旋多巴诱导的异动症大鼠的作用机制”
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问
各位大神!做免疫荧光细胞染色的时候,最终拍照的时候,我们除了保证曝光时间还有光照亮度统一以外,还要统一什么?
balalaLy
看你使用的显微镜有哪些参数是可以调的,反正都要一致。先大概看一下哪组的荧光比较明显,以亮度低的未基准设置一组曝光参数,以亮度高的一组设置一组曝光参数。就是拍两组不同曝光参数的图。
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问
CD31免疫荧光染色
汤姆卜丽波
重新做吧,染色分布不匀这个结果可信度不高
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求问免疫组化显色时间
申东熙老伯
显色时间是为了确认结果,只要显出来的组织颜色没问题就没问题。
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问
mTOR磷酸化抗体的选择
汤姆卜丽波
一般磷酸化都是相互作用的,看你做什么,选哪个都可以
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oligo的应用
灵枢天问
和引物设计一样的,先把你的序列贴上去,然后根据需求设置你的要求,然后search选择探针设计,再验证一下就可以了
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问
免疫组化平均光密度值
bamboopiggy
你应该圈出阳性的区域,然后算光密度值,否则虽然有阳性,但是平均下来,可能会低。
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求助,加药测细菌生长曲线大家都用什么仪器?
呜呼222
会不会是一开始种的板就没有种好呢,就是加入的菌量这些
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问
文献里的这个图怎么看呀
Dr_劉医生
是的,一个是绝对值,一个是百分比。分别检测了CD45+和CD45-两个抗体,上下是药物干预组和盐溶液对照组,
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问
碱基配对知识询问
灵枢天问
1.荧光dUTP与dATP配对能力更强 2.荧光dCT与dGTP配对能力更强 3.荧光dUTP与dATP的配对能力比荧光dCTP和dGTP配对能力更强 4.这方面内容的文献你要找互补配对的综述来看
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问
细胞用4%多聚甲醛固定后,缩巴了,咋整
汤姆卜丽波
缩巴了就不能用了。形态和结构都破坏了。
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问
巨噬细胞极化状态维持多久
vlinine
过程不可逆,不会变成M1,诱导因子不一样
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问
接种环划板后酒精灯火焰烧灼后,再次沾取菌液后菌液有黑色物质。对菌液有影响吗?
凌晨三点Dxy
应该是上一次菌液被灼烧碳化物,如果已经冷却了,问题不是很大,接种环灼烧后,如果用无尘纸擦一下也会擦出黑色物质,就是些碳化物啦
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问
请问可以将一个荧光蛋白和DAPI进行荧光共定位分析吗,看这个蛋白的入核情况
dxy_8xv5nk4r
可以,但是最好是做共聚焦,我做过NF-kb的入核,共聚焦拍的比较好
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问
我要做TCF4和下游基因X的CHIP。基因X的promoter区有5处TCF4的结合基序(CAAAG)。请问大家怎么设计引物?
汤姆卜丽波
只要有一个能结合就可以共表达,就按照正常流程或者送公司设计引物就行了
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重组酶聚合酶扩增
Dr_劉医生
高浓度质粒往往是不稳定的,而且质粒的扩增会占用大量资源,当载体用于表达或者其他用途时一般会用低浓度的
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问
dUTP与dTTP
Dr_劉医生
用dU不会对dT有影响,在PCR产物或引物中用dU代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU而阻止TaqDNA聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶,而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用。
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