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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
免疫组化样本加入固定液后是不是越快送检变成石蜡包埋块越好?
麻黄连翘赤小豆
24-48小时即可,有些硬组织就这样就可以送检,时间长了更硬,切不好、软组织你放半年也可以,不过到时候要做抗原修复
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问
关于NK激活问题
土井挞克树
事实上他们的诱发因素不一样,活化成功后的作用也有区别。
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问
5%~10%氢氧化钾在组织切片中软化蜱虫大致需要多少时间?
此用户已注销
用10%氢氧化钾溶液浸泡3~5分钟,放在显微镜下检查。
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【求助】免疫细胞与肿瘤细胞共培养观察杀伤情况
土井挞克树
如果是免疫细胞和肿瘤细胞没有区分,你可以采用标记,如果是区分的不理想,可以改变圈门
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问
诱导型启动子和组成型启动子
土井挞克树
看图片是组成型,有组成型序列。
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问
金标抗原保存时间
你好几和户
金标抗原按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免湿润。金标检测试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需要可分屡次运用;运用后的剩余试剂盒主张在初度实验后1个月内运用结束。
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问
如何设计前体miRNA引物和pri miRNA引物?
你好几和户
miRNA引物设计(茎环法)原理:由于miRNA在20bp左右,没法根据其设计引物检测出来,于是,人们就先将其延长,也就是先加一个环状片段,这样就使得原来20bp左右的延伸为80bp左右了,然后就可以根据这个80bp片段设计引物啦。具体操作:需要三种引物:逆转录引物(RT-primer,用于延长miRNA的)、实时定量PCR上游引物、实时定量PCR通用下游引物。
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问
悬浮细胞G418筛选细胞后如何去除死细胞及筛选时间
你好几和户
可以用流式分选,利用荧光素标记不同的分子,通过调节合适的电压、补偿等,通过荧光将目的细胞与非目的细胞区分开来。
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问
求助🆘PMA诱导THP-1分化 thp-1分化巨噬细胞
dxy_cdhg5oer
楼主问题解决没? 我的也是这样子😭
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问
悬浮细胞测不出细胞活力
bamboopiggy
1.你的细胞浓度2万确实有点大,可以调整一下。2,你加20ul的cck,那孔板中液体的体积是多少?一般加cck8 是加体积的10%。3.你有没有考虑过,在加入cck8后,1,2,3,4h分别测一下读值,看有没有差异。
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问
干细胞小鼠畸胎瘤实验请教
土井挞克树
是的,浓度太高或者你打的位置不对
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问
CAR-macrophage中BMDM的消化问题
土井挞克树
试用一下加利多卡因的消化方法。
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问
计数菌落时用LOG10表示,是怎么表示的呢?
idiotOC0P
就用记号笔点了一个一个数的,小技巧可以在平板上画个十字分区域数。然后由于要乘以稀释倍数,最后得到的菌落数量肯定是比较大的,用Excel记录了数据然后log一下就得到了这些数据
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问
T细胞活化
土井挞克树
不需要别的刺激,CD3 、 CD28 的抗体刺激T 细胞,模拟体内 T 细胞活化的双信号作用,是目前体外进行 T 细胞激活与扩增应用最广泛的方法
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问
小鼠腹腔注射1mg/kg,怎么配成注射的溶液体积?
bamboopiggy
先看你药物的说明书,只要你药物的干粉可以放-80,你用dmso溶解后,就可以放-80
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问
wb做出来的内参为啥是这样的,一抗加了15000:1,二抗也是15000:1,图一是GAPDH,图二是his3
申东熙老伯
his3看着还可以,内参背景脏可能是没封闭好,建议封闭的时候一张膜一张膜分开封闭,避免让两张膜叠在一起,洗膜的时候也是。
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问
请问大家CHIP-qPCR的结果怎样判定为阳性啊?下面是我的各组的CT值,这样算是阳性吗?
bamboopiggy
你首先要看你melt curve对不对,然后再对比ct值。比的是binding site和non-binding site
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问
想请教大家提取miRNA的时候更倾向于选择茎环法还是加尾法?
Dr_劉医生
两种方法都是miRNA反转的主流方法;茎环法,特异性略好,但每个miRNA都需要单独设计对应的茎环引物,较为繁琐。比较适合从多种样本检测单一miRNA。而polyA加尾法一次处理,可逆转录全部miRNA,只需设计后续特定的miRNA定量引物,即可选择性扩增想要miRNA。这个方式的通用性高,而且适合高通量检测。在miRNA的初步筛选中,加尾法方式较为优。当然经济,方便不在话下。所以看你具体目的
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问
实验小白,请问石蜡切片做免疫组化需要稀释tritonx100透膜吗?
bamboopiggy
你都把细胞切开了,就不需要透膜了
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问
【求助】BV-2活化状态
汤姆卜丽波
感觉还是非激活态,再过6小时看看
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